《表1 藤仓镰孢菌(F.fujikuroi)myosin5基因扩增反应体系》

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以测序菌株F.fujikuroi IMI58289核基因组的myosin5基因(FFUJ_01615)序列为参考序列,进行myosin5基因的克隆。myosin5基因扩增引物序列(5′→3′)f1:ATCTTCTGATGCCCGTAT;f2:CAGTCGT CTCCAGCCACA。采用25μL的PCR扩增体系(表1)。PCR反应温度参数为:95℃预变性3 min;95℃变性15 s,56℃退火15 s,72℃延伸(每1 kb DNA链长对应0.5 min),共30个循环;72℃延伸15 min。采用1.0%琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行观察,回收产物送南京擎科生物科技有限公司测序。采用Bioedit软件进行序列比对分析。