《表3 水稻模板DNA的检出限检测(n=8)》

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《基于实时荧光PCR技术检测水稻转基因成分》

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通过水稻内源基因及转基因成分的引物和探针分别对浓度为100ng·μL-1、10ng·μL-1、1ng·μL-1、0.1ng·μL-1、0.01ng·μL-1、0.001ng·μL-1、0.0001ng·μL-1、0.00001ng·μL-1的非转基因水稻和转基因水稻样品DNA进行实时荧光定量PCR扩增试验，对应的Ct值见表3，扩增曲线见图2，Ct值≤36判定为检出。由试验结果可知，稀释到1ng·μL-1的非转基因水稻和转基因水稻都出现了水稻内源基因SPS的典型扩增曲线，但其Ct值均>36，所以SPS基因在非转基因水稻和转基因水稻中的检出限为10ng。转基因成分p Ca MV35S在转基因水稻中的检出限检测结果见表3和图2C，从结果中可以看出稀释到0.1ng·μL-1的转基因水稻有p Ca MV35S基因检出，其Ct值为35.70±0.21；转基因成分t NOS在转基因水稻中的检出限检测结果见表3和图2D，从结果中可以看出稀释到1ng·μL-1的转基因水稻有t NOS基因检出，其Ct值为34.17±0.34。综上所述，水稻内源基因SPS的检出限达10ng，转基因成分p Ca MV35S的检出限达0.1ng，转基因成分t NOS的检出限达1ng。