《表1 PVA纤维参数:不同粒径聚苯乙烯微塑料和苯并(a)芘联合暴露影响炎性因子的表达》
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《不同粒径聚苯乙烯微塑料和苯并(a)芘联合暴露影响炎性因子的表达》
(ⅳ)炎性因子检测.检测的炎症因子包括TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-8和IL-1β.冻存的斑马鱼鳃组织和细胞,TRIzol(Invitrogen,美国)法提取总RNA,核酸蛋白分析仪(Thermo Nano Drop 2000,美国)检测浓度.反转录使用试剂盒Prime ScriptTMRT reagent Kit(Ta Ka Ra Bio Inc,日本),具体操作根据说明书.PCR体系包含12.5μL2×SYBR GreenⅡBuffer(Ta Ka Ra Bio Inc,日本),1μL正向引物(10μmol/L),1μL反向引物(10μmol/L)和2μL c DNA.PCR反应参数:95°C变性10 min,然后在95°C变性5 s,60°C退火延伸45 s,共40个循环.每个循环在60°C获得荧光数据.采用Light Cycler 96(Roche,瑞士)进行实时定量荧光PCR检测分析.引物设计使用Primer Premier 5.0,如表1所示.GAPDH作为细胞基因表达内参,β-catin作为斑马鱼基因表达内参,设置3个平行.采用2-ΔΔCt法处理数据,相对表达计算公式:
图表编号 | XD00200894500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.30 |
作者 | 徐雅雯、朱军、胡堇叶、张展、李磊、吴倩 |
绘制单位 | 南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系、南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系、南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系、南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系、南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系、南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系 |
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