《表2 5种根结线虫特异性引物》

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《河南省怀地黄根结线虫病发生分布与种类鉴定》


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采用5种不同根结线虫特异性引物进行检测(表2),统一采用25μL扩增体系:2×Fast Taq Mix酶12.5μL,上下游引物各0.5μL,DNA模板2μL,灭菌重蒸水补足至25μL。特异性引物扩增条件:94℃5 min;94℃45 s;59℃30 s;72℃1 min;共35个循环,72℃10 min;4℃保存。取10μL PCR产物于1%的琼脂糖凝胶中电泳,用0.5×TAE buffer作为电泳缓冲液,120 V电泳40 min,EB染色15min后进行拍照。