《表2 6种优化方案:双标多测法测定补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量》

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《双标多测法测定补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量》


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DRS Origin软件能快速地对双标化合物进行优化,通过数据拟合对色谱峰进行定位。将采集的色谱数据导入DRS Origin软件,通过关联对照品,设定双标成分,进行双标线性校正法分析,得到保留时间预测准确率和色谱柱符合率[5]。优化4个成分中,选择2个作为双标成分,有多种方案。试验中,通过DRS Origin软件的计算,筛选出了6种双标选择方案(见表5),能保证色谱柱符合率达到95%,其中峰1~峰3组合的预测正确率为100%,色谱柱符合率为100%。保留时间回归偏差:0.036 1 min,按照双标选择尽量分布在保留时间两端的原则,运行双标对照品溶液和供试品溶液,将补骨脂苷和补骨脂素为双标化合物,以这2个成分的SRT值为横坐标,实际保留时间为纵坐标,将色谱柱col13作为验证柱:补骨脂苷5.082 min,补骨脂素19.883min为横坐标,得到两点补骨脂苷(5.082,4.963)和补骨脂素(19.883,20.087)做一直线,方程为Y=1.0218X-0.2299,然后将其余2个成分的SRT值(X值)代入方程,得到预测保留时间:异补骨脂苷5.899 min,异补骨脂素23.521 min,实际保留时间依次为5.947、23.857 min;相对偏差依次为0.41%、0.70%,满足单纯定性条件下,预测保留时间与实测保留时间的误差应不超过0.5 min的要求,说明该双标选择在col 13上预测效果良好,见表2、图2。