《表1 Bax、Caspase-3、Bcl-2基因引物序列》

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《川崎病急性期患儿血清对人脐静脉血管内皮细胞氧化应激、增殖及凋亡的影响》

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选择2017年1月～2018年1月于我院住院治疗的KD急性期患儿12例，男7例、女5例，年龄1岁5个月～6岁11个月，均符合2004年美国儿科学会和心脏病学会制订的诊断标准，病程均在1周以内，未经过IVIG治疗。选取同期在本院儿科门诊体检的健康儿童10例作对照，男6例、女4例，年龄2岁1个月～6岁10个月。检查证实肝肾心功能正常，无基础心血管疾病，无感染性及免疫性疾病。在经医院医学伦理委员会批准、研究对象监护人知情同意的情况下，抽取KD患儿及健康儿童外周静脉血2 m L，EDTA抗凝，1 500 r/min离心5 min，收集上清液，-80℃冰箱保存。HUVEC（上海中乔新舟生物科技有限公司），RPMI-1640培养基（美国Hyclone公司），CCK-8溶液（中国Bio Sharp公司），MDA、SOD ELISA试剂盒（武汉百仟度生物科技有限公司），FACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司），DCFH-DA粉剂（美国Sigma公司），RNA提取液（美国Invitrogen公司），Revert Aid First Strand c DNA Synthesis Kit （美国Thermo公司），Fast Start Universal SYBR Green Master（美国Roche公司），荧光定量PCR仪（美国ABI公司），引物由武汉百仟度生物科技有限公司合成（引物序列见表1），兔抗人Bcl-2一抗（美国CST公司），兔抗人Caspase-3一抗（英国Abcam公司），兔抗人Bax一抗（英国Abcam公司），山羊抗兔HRP标记二抗（美国KPL公司）。