《表5 两种纯化方式下HBs Ag纯化效果的比较》

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《基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究》


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对硅胶洗脱液进一步开展疏水层析。由疏水层析谱图5(a)可知,穿透峰中260 nm处的吸收值大于280 nm,表明样品中有大量核酸直接穿透。洗脱峰中260 nm处吸收值低于280 nm,证明核酸含量很低,表明疏水层析能够除掉大部分核酸。由图5(b)电泳图可知,洗脱峰中抗原全部被巯基乙醇打开二硫键,成为单体,其分子量约为24 k Da。进一步利用HPSEC对两种纯化方式获得抗原颗粒完整性进行分析,抗原完整分子量大于2000 k Da,根据凝胶过滤分析柱分级范围,选择TSK G5000 PWxl分析柱进行检测,结果如图5(c)所示,对谱图中HBs Ag峰面积进行积分。由表5可知,加入硅胶后的HIC洗脱峰的抗原颗粒完整性为85.79%,活性收率为49.73%;与常规HIC相比,颗粒完整性提高了20.90个百分点,活性收率提高了31.99个百分点。因此加入硅胶有利于提高抗原颗粒完整性和活性收率。