《表1 参与者信息表:一株鸭源贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及药敏试验》

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《一株鸭源贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及药敏试验》


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以分离纯化后的菌液为模板,使用细菌通用16S rRNA引物进行PCR扩增。上游引物F:5’-AGAGTTT GATCMTGGCTCA-3’;下游引物R:5’-TACG GYTACCTTGTTACGACT-3’。引物由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成(预扩增片段1 450 bp)。PCR反应体系25μL:2×Es Taq DNA聚合酶12.5μL,上、下游引物(10μmol/L)各1μL,菌液2μL,dd H2O 8.5μL。PCR反应条件:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸90 s,共30个循环;72℃终延伸10 min。PCR反应产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳进行检测,并送英潍捷基(上海)贸易有限公司测序。将所测分离菌的16S rRNA与Gen Bank数据库的参考菌株16S rRNA (见表1)进行BLAST同源性比对,利用生物学软件Megalign构建系统进化树。