《表1 RAPD引物信息：宁夏地区临床型奶牛乳房炎非白色念珠菌分离株生物学特性分析》

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《宁夏地区临床型奶牛乳房炎非白色念珠菌分离株生物学特性分析》

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设计并合成RAPD引物见（表1），随机扩增多态性DNA。反应体系：1μL模板DNA（50ng），dNTPs 2.5μl（0.25μmol/L），Taq酶0.2μl（51.2U/μl），随机引物2.5μl(10μmol/L），10×Buffer 2.5μl，MgCl22.5μl(1.5 mmol/L），用ddH2O补至25μl。扩增条件：94°C预变性5min；94°C 45s，53°C45s，72°C 1.5min，共35个循环；72°C退火10min。PCR产物进行2%琼脂糖凝胶电泳分析，分型标准：PCR扩增产物的电泳位置在凝胶的某个相同迁移率位置上有DNA条带记为1，反之记为0。形成RAPD的表型数据矩阵，采用NTSYS软件计算相似系数（DICE系数），并且按照遗传系数进行UPGMA聚类分析。