《表1 免疫组织化学染色半定量评分标准》

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《低蛋白饮食、尼古丁皮下注射和自然选择形成的胎儿生长受限大鼠模型胎盘细胞凋亡研究》

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（1）胎盘取材：新鲜胎盘组织2/3置于10%中性甲醛固定24h，做成石蜡块；1/3经生理盐水脐静脉灌注冲洗后置于-80℃冰箱用于RNA提取。（2）胎盘细胞凋亡率测定：每个蜡块取3张4μm切片后置于BX63全自动智能荧光显微镜高倍镜视野下，按“弓”字形不重叠摄片，以细胞核出现棕色颗粒为增殖细胞核抗原（PCNA）表达阳性，以细胞凋亡率（AI）=阳性细胞数/细胞总数×100%为量化指标，对比3个研究组与正常对照组胎盘细胞凋亡水平的差异。（3）凋亡因子（Bax、Bcl-2、p53、Fas和Fas-L）mRNA表达水平采用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测。（4）凋亡因子（Bax、Bcl-2、p53、Fas和Fas-L）蛋白表达水平采用免疫组织化学染色检测半定量分析。免疫组织化学染色半定量评分标准见表1。