《表2 Sar A基因扩增体系》

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《金黄色葡萄球菌SarA、IcaA及其融合基因的DNA疫苗构建及在小鼠免疫应答中的初步研究》

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将金黄色葡萄球菌ATCC 6538进行菌种复苏，用基因组小提试剂盒进行金黄色葡萄球菌基因组提取，以基因组为模板，用P1和P2进行PCR扩增目的片段SarA，扩增体系见表2，反应程序:95℃预变性5min；95℃变性30s，42.6℃退火30s，72℃延伸40s，10个循环；95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸40s，20个循环；72℃充分延伸10min；用P3和P4扩增目的片段IcaA，扩增体系及反应程序同SarA，72℃延伸90s；用P5和P2、P3和P6分别对SarA和IcaA两个基因进行PCR扩增，各取3μl SarA和IcaA PCR扩增产物作为模板，进行PCR反应扩增IcaA-SarA融合基因，扩增体系及反应程序同Sar A，72℃延伸2min。