《表2 胰蛋白酶处理显示的κ-酪蛋白序列片段》

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《甲醇芽孢杆菌蛋白酶的水解特性及酪蛋白水解产物活性分析》


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将蛋白酶LB-1水解κ-酪蛋白得到的主要肽段(约11 kDa)用胰蛋白酶酶解,将酶解片段进行液相色谱-串联质谱指纹图谱分析,结果如表2所示。胰蛋白酶酶解得到12条肽段,所有肽段均以赖氨酸或精氨酸结尾,符合胰蛋白酶的水解规律。从图4可以看出,κ-酪蛋白裂解出的主要肽段中,多肽肽段序列从κ-酪蛋白氨基端的第22位异亮氨酸开始,到第112位的赖氨酸结束,且未检测到113位的天冬氨酸残基,表明蛋白酶LB-1对κ-酪蛋白的水解位点主要有2个,分别为Lys21-Ile22和Lys112-Asn113。这个主肽含有90个氨基酸,分子质量为10.537 kDa,这与凝胶电泳分析(图3C)的大小一致。