《表1 荧光原位杂交技术探针信息》

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《高通量测序染色体拷贝数嵌合型结果分析模型的建立及其对性染色体嵌合体和多倍体异常的鉴别价值》


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108份标本同时进行FISH检测,常规常温清洁条件下取15 mg流产组织绒毛标本至15 ml离心管并剪碎,37℃条件下浸泡于8 ml浓度为0.075 mol/L氯化钾溶液中20 min,随后加入1 ml提前配好并37℃温浴的固定液(甲醇∶冰醋酸=3∶1)继续温浴2 min,于常温1 800 r/min离心10 min,离心半径20 cm,弃上清,加入8 ml温浴的固定液重复固定3次,留沉淀加入0.5 ml固定液,混匀后取3~4滴于洁净的载玻片上,75℃烤干载玻片30 min,于滴片处加入AneuVysion fluorescence 18/X/Y probe荧光探针,探针信息见表1。实验操作严格按照Abbott Reagent Box protocol strictly(Abbott Molecular Inc,美国)试剂盒进行,在Hybrid instrument(Abbott Molecular ThermoBrite Stat Spin,美国)杂交仪进行杂交,杂交条件为74℃变性5 min,37℃杂交16 h,之后取出加DAPIⅡ复染剂复染。检测结果在OLYMPUS BX53荧光显微镜下进行观察,每份样本计数50~100个间期细胞核。