《表1 N.ansamitocini EGI80425对不同抗生素的敏感性》

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《安丝菌素产生菌拟诺卡氏菌EGI80425接合转移体系的建立与应用》

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注:+:敏感；-:不敏感

为了确定N.ansamitocini EGI80425的遗传操作体系中的可用抗性标记，本研究首先检测了该菌株对多种常见抗生素的敏感性。在固体YMG培养基中添加不同的抗生素，取200μL菌丝体均匀涂布于含不同抗生素的培养基上，30℃培养7 d，观察菌丝体生长情况。结果表明，N.ansamitocini EGI80425对卡那霉素、氯霉素、安普霉素、硫链丝菌素、链霉素、壮观霉素、四环素、潮霉素均敏感，而对氨苄青霉素、萘啶酮酸和甲氧苄氨嘧啶都不敏感（表1）。因此，在对N.ansamitocini EGI80425进行遗传改造时，可以选用该菌株敏感的抗生素的抗性基因作为筛选标记；接合转移后可以使用萘啶酮酸或甲氧苄氨嘧啶进行覆盖，抑制供体菌大肠杆菌的生长。