《表1 常用解离液对芜菁样品的处理效果对比》

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《流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量方法》

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注:-:未能制备出适合上机检测的细胞核悬浮液

流式细胞仪所检测的样品必须是单个完整的细胞悬浮液，所以分离完整细胞核并去除悬浮液中的杂质与碎片是试验成功的关键（Sliwinska，2018）。一般在采用流式细胞术检测DNA含量时，变异系数（coefficient of variation，CV）应保证在8%以下以得到可靠的数据（Johnston et al.，1999）。检测芜菁样品的CV值结果表明，GPB与WPB解离液未能释放出足量的细胞核用于上机检测；Marie's解离液只能制备一个样品的细胞核悬浮液，而且CV值为19.03%，不适合作为流式细胞术分析的解离液；HEP-ES解离液所制备的4个样品细胞核悬浮液出峰较差，CV值均大于10%；OTTO解离液在制备‘温州盘菜’和小孢子再生植株Ⅰ时，CV值过高。以上解离液均不适用于流式细胞术鉴定芜菁倍性与DNA含量。Galbraith's解离液在处理小孢子再生植株Ⅰ时，CV值达8.54%，上机检测得出的峰形较宽。LB01与Mg SO4解离液对芜菁材料的解离效果较好，但是Mg SO4不能充分地对对照样品紫花苜蓿进行解离，只有LB01既适合芜菁材料也适用于对照样品紫花苜蓿材料（表1）。