《表2 细胞核解离液配方:流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量方法》

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《流式细胞术检测芜菁倍性与相对DNA含量方法》


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分别选取待测芜菁材料及外标紫花苜蓿的嫩叶1 g,将叶片置于培养皿中并加入1 mL解离液,用锋利的刀片快速切碎叶片释放出细胞。切碎叶片的过程中,需要将叶片组织完全浸没在解离液中。将提取得到的细胞核悬浮液用500目滤网过滤至1.5 m L离心管中。将离心管放入转速1 000 r/min,温度4℃条件下离心5 min。弃上清液后加入100μL解离液,同时加入150μL PI染料,混匀后置于4℃冰箱孵育30 min,然后上机检测。试验过程中所用器具、解离液(表2)及PI染料应保证经4℃低温预冷。