《表4 scFv-Fc蛋白活性的间接ELISA检测》

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《抗H3N2亚型犬流感病毒重组犬源化抗体的制备及特性分析》

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用纯化的06病毒包被酶标板后，将倍比稀释的scFv（起始浓度1 mg/mL）作为一抗，His‐Tag单抗联合HRP标记的山羊抗鼠IgG抗体进行检测，同时以小鼠阳性血清为阳性对照，空载体蛋白为阴性对照，经TMB显色后，结果表明，scFv 1∶210(0.00098mg/mL）稀释时，P/N>2.1（表3），说明纯化透析的scFv具有较高的活性，能与犬流感06病毒发生特异性反应。以倍比稀释的scFv‐Fc（起始浓度1mg/mL）作为一抗，HRP标记羊抗犬IgG酶标抗体作二抗，同时感染犬血清为阳性对照，以空载体蛋白为阴性对照进行检测。当scFv‐Fc 1∶25(0.0312 mg/mL）稀释时，P/N>2.1（表4），说明纯化的scFv‐Fc具有一定的蛋白结合活性，能与犬流感病毒发生特异性结合。但嵌合抗体效价明显低于单链抗体，猜测嵌合Fc后的翻译折叠过程对scFv部分的抗原结合位点有所掩盖。