《表2 连栀矾溶液发酵前后对变形杆菌体外抑菌作用测定结果(n=3)》

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《发酵工艺对连栀矾溶液活性成分及体外抑菌活性的影响》

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注:“-”为无菌生长；“+”为有菌生长。

采用微量肉汤稀释法[12～14]，按无菌操作规程，取一次性无菌96孔板（每排12孔），向第2～10列各加入MH（B）培养基100μl，再分别吸取连栀矾溶液（发酵前）、连栀矾溶液、碱沉样品、醇沉样品、苯和氯仿萃取样品以及硫酸庆大霉素样品100μl加入第1孔和第2孔，混匀后从第2孔吸取100μl加入第3孔，从第3孔吸取100μl加入第4孔，如此连续倍比稀释至第10孔，第10孔中吸取100μl弃去，此10个孔作为试验组；第11孔只加培养基100μl，用以观察培养基是否适合菌株生长，作为空白对照组；吸取浓度为1.0×105cfu·ml-1的菌悬液100μl，依次加入到上述1～11孔中，充分混匀，此时各孔菌浓度均为0.5×105cfu·ml-1；第12孔只加培养基200μl，用以观察培养基是否被污染，作为阴性对照组。将96孔板加盖置于37℃恒温培养箱中培养24 h后，取出观察菌株生长情况，在黑色背景光源下，如肉汤浑浊或孔底出现浑浊，则判断为有菌生长[15]。将无菌生长的试验孔所对应的最低药物浓度记为该药物的MIC，每个样品平行测定3次，3次试验中只要有1次出现浑浊，即判定为有菌生长，结果见表2～4。连栀矾溶液（发酵前）对变形杆菌、金色葡萄球菌和大肠埃希菌的MIC分别为稀释8倍、稀释4倍和稀释4倍后的样品浓度；连栀矾溶液对变形杆菌、金色葡萄球菌和大肠埃希菌的MIC分别为稀释32倍、稀释16倍和稀释8倍后的样品浓度；碱沉组分对变形杆菌、金色葡萄球菌和大肠埃希菌的MIC分别为稀释2倍、稀释1倍和不稀释后的样品浓度；90%乙醇醇沉部分对变形杆菌、金色葡萄球菌具抑制作用，对大肠埃希菌无抑制作用；苯和氯仿萃取部位对上述3种菌均不具有抑制作用。