《表1 免疫表型参数：肿瘤患者淋巴细胞亚群精确检测临床分析》

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《肿瘤患者淋巴细胞亚群精确检测临床分析》

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2.研究方法:免疫检测指标:包括10种免疫细胞百分比及计数和CD4+/CD8+值，共21项指标。见表1。试剂与仪器:荧光标记的小鼠抗人CD45、CD3、CD4、CD8、CD16、CD19、CD28、CD56和CD127单克隆抗体均购自美国BD公司。流式细胞仪为美国Beckman Coulter公司产品。免疫细胞亚群检测:空腹抽取外周血，加入EDTA抗凝管，常温24 h内检测。缓慢颠倒混匀EDTA采血管8次；取流式管编号标记，加入血样100μl及相对应的流式抗体；涡旋混匀后，避光孵育15 min；每管加入裂红素500μl，涡旋混匀后，避光孵育10 min；各管分别加入1ml磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline，PBS），旋涡混匀后，离心力251.55（×g）离心5min，去上清吸水纸吸干，重复清洗操作1次，加入400μl PBS，旋涡混匀后上机检测。每检测管至少收集10 000个数据，使用FLOWjo 7.6软件分析CD45阳性细胞各亚群比例。