《表1 引物设计：前交叉韧带损伤后软骨退变和骨性关节炎发生的分子变化》

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《前交叉韧带损伤后软骨退变和骨性关节炎发生的分子变化》

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用Trizol试剂从培养的软骨细胞中提取总细胞RNA，保存28S和18S核糖体RNA（rRNA）用于评估RNA的完整性。所有纳入研究的样本均含有显著的28S和18S rRNA成分，用分光光度法对收率进行定量测定。使用SuperScriptⅢ逆转录酶和随机引物将1μg RNA反转录成cDNA。通过实时PCR量化MMP-13、IL-6和IL-1β的mRNA表达。为量化每个基因的相对表达，用内参基因的Ct值归一目标基因的Ct值（ΔCt=Ct目标-CtGAPDH），而使用ΔΔCt方法校准（ΔΔCt=ΔCt样本-ΔCt校准）。寡核苷酸引物用于MMP-13、IL-6和IL-1β的扩增（表1）。