《表1 扩增及验证引物:大肠杆菌ptsG基因缺陷菌株的构建及其发酵混合糖产L-丙氨酸》

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《大肠杆菌ptsG基因缺陷菌株的构建及其发酵混合糖产L-丙氨酸》


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出发菌为大肠杆菌(Escherichiacoli)基因工程菌JH-B2[2](Δfrd BC,Δadh E,Δpta,Δpfl B::ala D),可以高效利用葡萄糖和木糖产丙氨酸,由本实验室前期构建并保存;E.coli JH-B3是通过Red同源重组技术获得的pts G基因缺陷菌株。质粒p KD4含有包含了硫酸卡那霉素(kanamycin,Kan)抗性基因的FRT-kan-FRT阅读框和氨苄青霉素(ampicillin,Amp)抗性基因,p KD46包含编码Red重组系统的基因和Amp抗性基因[14],两种质粒均由武汉天一辉远生物技术有限公司购得。实验所需引物均由武汉天一辉远生物技术有限公司合成,引物名称和序列见表1。