《表1 HPLC分析呋喃素梯度洗脱程序》

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《乳蛋白中可利用赖氨酸及其封闭产物含量的测定》

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准确称取2 g左右（精确至0.0001 g）乳粉样品于烧杯中，加水至约25 g，充分混匀。准确称取2 g左右（精确至0.0001 g）复溶乳粉样品（液态乳样品直接称取2 g左右）于55 mL PTFE微波消解管中，加入8 mL盐酸溶液（6 N），涡旋混匀后，充氮5 min后立刻旋紧盖子，于110℃烘箱中加热20 h。取出冷却至室温后，混匀。量取2 mL于15 mL离心管中，加入5 m L柠檬酸钠溶液（0.7 M），混匀后经0.45μm尼龙滤膜过滤进行HPLC分析。使用呋喃素盐酸盐为标准品绘制标准曲线，外标法定量。使用安捷伦1260 HPLC配置紫外可见检测器进行分析。色谱柱为YMC-Pack ODS-AQ（250 mm×4.6 mm I.D.，5μm），柱温20℃，进样量5μL，检测波长为280 nm。流动相A为0.02 mol/L磷酸二氢钾磷酸缓冲液，pH 2.9；流动相B为磷酸二氢钾磷酸缓冲液（0.02 mol/L，pH 2.9）∶异丙醇∶乙腈=26∶7∶7。梯度洗脱程序见表1。