《表2 鳙10对引物基本信息》

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《基于微卫星标记对长江江苏段鳙增殖放流效果评估》

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所有采集样本均剪取少部分腹鳍保存于分析纯乙醇当中，带回实验室备用。DNA提取采取试剂盒法（TIANamp Marine Animals DNA Kit，TIANGEN，天根生化科技(北京）有限公司)抽提，经1.0%琼脂糖凝胶（Nared染色）电泳检测，合格的DNA样品保存于–20℃冰箱用于后续PCR扩增。参照张丹[18]已经发表的10对高度多态性且易分型的微卫星标记，由江苏天霖科技无锡有限公司合成引物，并对引物5?端做荧光基团（FAM或HEX）修饰见表2。PCR反应体系为20μL:Premix Taq（TaKaRa TaqTM Version 2.0 plus dye）10μL、上下游引物各0.5μL、基因组DNA模板（50 ng/μL）1μL和无菌水8μL。扩增程序为:94℃预变性2 min；94℃变性20 s，50～56℃（表2）退火30 s，72℃延伸30 s，30个循环；72℃延伸5 min，10℃保存。扩增产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳检验，通过全自动凝胶成像分析系统（Syngene）观察目的条带成像效果。利用基于毛细电泳技术的自动测序仪ABI Prism3 730 xl（Rox-500 standard）对扩增产物进行分型。