《表3 分离胶和浓缩胶的配制》

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SDS-PAGE凝胶电泳检验,具体方法如下:制胶→上样→电泳→剥胶→固定→染色→脱色→凝胶成像。将待测样品适当稀释后,加入等体积的样品缓冲液(含5%β-巯基乙醇和2%SDS),沸水浴5~10 min备用。依据表3配制分离胶和浓缩胶,点样15μL,利用Bio-Rad公司MiniProtean II电泳槽进行电泳,浓缩胶电压80 V时间30 min;分离胶电压100 V时间120 min。电泳结束取出胶块,首先用配制好的考马斯亮蓝R-250染液(0.15%溶于脱色液)染色2~3 h。然后用脱色液∶甲醇∶醋酸∶水(227∶37∶236,v∶v∶v)脱色3~5次。脱色完毕将胶块放入凝胶成像仪成像,并用Quantity One软件进行分析。