《表2 单克隆抗体的配对筛选》

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《重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备》

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注：—表示未进行此组检测

经过一系列筛选，共得到5株单克隆抗体（1D7、2A3、2E6、5F1和6H12），经过蛋白免疫印迹验证，它们都能特异性识别Lp-PLA2蛋白，见图5。使用抗体分型试剂盒对所述单克隆抗体进行亚型鉴定，其中1D7、2E6、5F1和6H12为IgG2b亚型，轻链为κ链，2A3为IgG2a亚型，轻链为λ链。对5株抗体进行两两配对的双抗体夹心ELISA检测分析显示，使用2E6作为包被抗体、5F1为检测抗体时，具有较高的检测灵敏度，见表2。通过间接ELISA法检测，本实验所制备得到的Lp-PLA2抗体效价可达1∶2×106以上，见图6。将该抗体包被酶标板，对Lp-PLA2蛋白、纤维蛋白原、C-反应蛋白进行ELISA检测，发现抗体不会与纤维蛋白原、C-反应蛋白等发生交叉反应，具有较好的特异性，见图7。