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实验须知1

蛋白质化学2

实验一蛋白质的沉淀反应2

一、蛋白质的盐析作用2

二、乙醇沉淀蛋白质3

三、重金属沉淀蛋白质3

四、生物硷试剂沉淀蛋白质4

附注 几种分离大分子的方法4

一、盐析及透析法5

二、低温有机溶剂沉淀法7

三、冷冻干燥7

四、超离心法7

实验二 蛋白质等电点的测定9

实验三血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳10

附注 电泳13

一、基本原理13

二、几种电泳简介15

实验四凝胶层析分离蛋白质19

附注 层析法23

一、吸附层析23

二、分配层析26

三、凝胶层析27

四、离子交换柱层析28

五、亲和层析28

实验五 氨基酸的薄层层析31

实验六 牛胰核糖核酸酶的变性及复原32

实验七血红蛋白和氧合血红蛋白吸收光谱的分光测定35

附注 分光法原理36

一、光电比色法37

二、分光光度法39

（一）721型分光光度计40

（二）751型可见紫外分光光度计41

实验八蛋白质定量43

一、微量Kjeldahl氏定氮法43

附注一、回收试验46

附注二、容量仪器及其校正46

二、比色法52

（一）双缩脲法52

（二）Folin-酚试剂法54

三、紫外分光光度法55

实验九DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质57

核酸化学60

实验十RNA的水解及其组成成分鉴定60

实验十一 DNA的变性61

实验十二细胞质和细胞核中核酸含量测定63

附注 测定组织核酸含量的三种方法简介65

酶66

实验十三蔗糖酶的专一性66

实验十四影响酶活性的因素68

一、温度对酶活性的影响68

附注：关于酶的最适温度的讨论69

二、pH对酶活性的影响70

附注 酶的最适pH71

三、激动剂和抑制剂对酶活性的影响71

（一）Na+、Cu2+、Cl-、和SO42-对唾液淀粉酶活性的影响71

（二）丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响72

附注酶的激动剂与抑制剂74

实验十五酶的米氏常数（Km）测定76

一、蔗糖酶米氏常数的测定76

二、过氧化氢酶米氏常数的测定78

附注 米氏常数的意义及应用81

实验十六 乳酸脱氢酶同工酶的测定（聚丙烯酰胺凝胶电泳）84

实验十七 乳酸脱氢酶87

附注酶蛋白与小分子物质的分离方法简介89

一、透析法89

二、超滤法89

三、吸附法89

维生素90

实验十八胡萝卜素的色层分析90

附注 吸附层析及吸附剂的简介91

实验十九维生素C的定量（2，4-二硝基苯肼法）92

附注一、抗坏血酸2，6-二氯酚靛酚滴定法简介94

附注二、提取抗环血酸的注意事项94

实验二十维生素B1的定性（荧光法）95

附注 荧光分析法简介95

附：几种食物中一般营养成分表97

物质代谢99

实验二十一、饱食、饥饿和激素对肝糖元含量的影响99

一、饱食、饥饿和激素对肝糖元含量的影响99

二、肝糖元的提取与鉴定100

实验二十二胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响102

附注一、测定血糖的其它方法104

附注二、血液样品的采集105

附注三、血滤液的制备106

实验二十三血浆脂蛋白的电泳106

一、醋酸纤维薄膜电泳106

二、血浆脂蛋白聚丙稀酰胺凝胶圆盘电泳107

实验二十四 转氨基作用（圆形纸层析法）108

实验二十五 精氨酸酶的作用111

实验二十六 运动对血中乳酸含量的影响（Barker ＆ Summerson改良法测定末梢血乳酸）113

实验二十七 细胞色素氧化酶的作用及其抑制与解毒115

实验二十八Warberg氏呼吸计测压法117

示例 肝组织耗氧量的测定120

附注一、气体分析法122

附注二、中间代谢的重要研究方法简介122

临床生化124

实验二十九血清总胆固醇的测定124

附注 测定血清总胆固醇的方法简介125

实验三十血清三酸甘油酯的测定（抽提法）126

附注 其它测定方法的简介127

实验三十一血清谷丙转氨酶活性测定（金氏法）128

附注一、测定血清谷丙转氨酶两类方法的简介129

附注二、酶的活性单位130

实验三十二全血非蛋白氮（NPN）的测定130

附注 其它测定方法的简介132

实验三十三血清钾钠测定（火焰光度法）132

一、国产630-C型火焰光度计132

二、国产6400型火焰光度计133

附注一、火焰光度法基本原理135

附注二、血钾钠测定方法的简单评价137

实验三十四 血清钾的测定（四苯硼钠比浊法）138

实验三十五血清钙的测定（草酸盐高锰酸钾滴定法）139

附注 其它测定方法简介141

实验三十六血浆二氧化碳结合力的测定141

一、量积法141

1、Van Slyke量积法141

2、安生-Ⅰ型CO2结合力气量仪测定法143

二、滴定法146

附注其它测定方法简介147

实验三十七尿淀粉酶活性的测定（Winslow氏法）148

附注 其它测定方法简介149

附录150

Ⅰ试剂配制法150

Ⅱ 缓冲液及酸硷指示剂配制法158

Ⅲ 电动离心机的使用（附转速与FR换算列线图）163

Ⅳ 玻璃仪器洗涤及各种洗液的配制法166

Ⅴ 几种动物的生化常数表169

主要参考书目172