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目录1

Ⅰ．根瘤菌的培养、分离和保存1

一、培养1

材料的灭菌1

污染的排除2

常规复合性培养基3

选择性和指示性培养基4

特定培养基4

二、分离6

从根瘤中分离根瘤菌6

从土壤中分离根瘤菌8

分离物或提供的培养物的鉴定8

三、保存9

琼脂培养物9

干燥处理的培养物10

培养物的记载12

一、概述14

Ⅱ．根瘤菌的定性特性14

二、用光学显微镜鉴定15

光源及其控制15

相差显微镜15

简单的水封片16

水在油中的封片16

单染色16

革兰氏染色17

嗜苏丹颗粒18

特殊染色18

异染色粒19

鞭毛染色19

类核体19

根瘤中细菌的检定19

根瘤结构20

培养细胞的电子显微镜技术22

根瘤的电子显微镜技术23

根瘤细胞中脱氧核糖核酸的测定23

碳源的利用24

在石蕊牛奶中的生长及反应24

三、培养特征和代谢特征24

在酵母汁-甘露醇琼脂上的生长24

维生素的刺激作用25

四、抗原特性25

抗血清的发生26

血液的收集和抗血清的贮藏28

抗血清吸附的原理29

长凝集试验29

短凝集试验31

盘皿凝集法32

用压碎的根瘤汁做凝集测定33

用于凝集反应的吸附试验33

凝胶免疫扩散法33

做凝胶扩散的吸附抗血清38

用萤光抗体反应鉴定39

五、噬菌体和溶原性39

噬菌体的证明39

噬菌斑的形成40

噬菌体的分开40

根瘤菌噬菌体的分离40

纯化41

噬菌体和寄主的分类41

吸附42

溶原性42

培养基42

六、根瘤菌的鉴别44

从根瘤中分离的培养物44

提供的培养物44

来自一混合菌株的培养物44

Ⅲ、计数48

一、概述48

二、总生长的测定48

总细胞计数48

平板计数52

浊度测定52

三、活根瘤菌的计数52

稀释液的制备53

常规的平板计数55

Miles和Misra液滴平板计数55

间接“植物感染”计数56

基于Fisher和Yates的密度测定57

“最可几数”（“最大或然性”的测定）66

应用植物感染计数时的限制69

Ⅳ．结瘤和固氮的鉴定70

一、概述70

二、有效性的指标71

三、温室和光照室方法71

用幼苗琼脂或营养液培养的方法71

在幼苗琼脂上的封闭式培养72

在幼苗琼脂上的部分封闭培养78

其他介质81

大型装置82

环境的控制90

研究植物-根瘤菌相互关系的特殊技术92

精细的固氮研究方法92

四、田间试验92

位置的选择93

实验操作94

播种前的准备94

肥料的施用95

接种95

测定96

敏感性96

菌株的鉴定97

用凝聚反应鉴定菌株99

菌株的凝胶扩散法鉴定100

不接种的豆科植物的结瘤101

氮状况的表现征状101

一、田间观察101

Ⅴ．对豆科植物接种需要的估计分析101

二、自然状况下的根瘤菌102

初步估计102

详尽的研究103

从已长成或播种的豆科植物中直接分离103

关于处理的说明104

试验的变数104

概述104

三、田间条件下对接种的反应104

设计与重复105

观察记录与收获106

预防措施107

用土心作的试验108

Ⅵ．豆科植物接种剂的生产、检查控制和应用109

一、培养的方式和生产109

培养方式109

多菌株的接种剂110

菌株的选择和保藏110

琼脂培养物111

液体培养物112

泥炭（土壤-泥炭）载体培养物112

培养物所需的标准117

二、检查控制的方法117

肉汤培养物的质量118

成品的检查119

种子上根瘤菌的数目120

应用接种剂的用量121

三、种子接种的方法121

培养物的种类121

球化种子122

附录127

附录一　氮素测定127

附录二　改良的F？hraeus氏载玻片技术134

附录三　一种手工操作的无菌播种器136

附录四　豆科植物参考材料的收集140

参考文献143