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第一章 免疫球蛋白与B细胞分化1

一、免疫球蛋白超基因家族1

二、免疫球蛋白的结构9

三、B淋巴细胞和浆细胞的分化13

第二章 免疫球蛋白合成的遗传学：免疫球蛋白基因重排16

一、免疫球蛋白合成的早期理论16

二、人类k轻链基因18

三、人类λ轻链基因19

四、重链VH基因的组装21

第三章 免疫球蛋白可变区片段的重排机制24

一、作为重排信号的DNA序列24

二、抗体多样性发生的遗传机制26

三、免疫球蛋白基因的激活次序28

四、重链恒区基因顺序和类型的转换29

五、组织特异性强化子促进免疫球蛋白基因的转录31

二、B细胞表面免疫球蛋白受体34

一、参与B细胞对特异抗原反应的成分34

第四章 B淋巴细胞的膜转移信号34

三、B细胞的Fc受体(FcγR)37

四、淋巴因子受体37

五、与Ⅱ类MHC抗原的关系38

六、补体受体38

第五章 T细胞抗原受体42

一、T细胞分化与表型42

二、T细胞受体的结构50

三、T细胞受体基因的组成52

四、胸腺细胞中的T细胞受体基因变化52

五、T细胞受体多样性的发生53

六、TCRγ/δ受体的作用56

第六章 人类TCRγ和δ基因及抗TCRγ/δ单克隆抗体60

一、抗TCRγ/δ单克隆抗体的意义60

二、TCRγ/δ基因和蛋白60

三、抗TCRγ/δ的单克隆抗体种类63

四、TCRγ/δ阳性淋巴细胞的功能和识别性64

五、病理状态的免疫表型研究65

第七章 MHC的分子遗传学67

一、主要组织相容复合物(MHC)67

二、MHC的遗传学结构68

三、基因和假基因70

四、Ⅱ类MHC抗原的功能70

五、T细胞与MHC抗原反应71

六、MCH的限制性71

第八章 抗原特异性T细胞辅助和抑制因子75

一、抗原特异性T细胞辅助因子和抑制因子的结构75

二、细胞免疫反应必须依赖辅助和抑制因子75

三、细胞接触和可溶性因子76

三、抗原特异性因子的激活77

四、遗传限制性的意义77

第九章 干扰素81

一、干扰素的命名及生化概要81

二、干扰素的产生82

三、干扰素的作用83

第十章 淋巴因子与白介素87

一、淋巴因子的名称87

二、淋巴因子的生物学特征89

三、淋巴因子与白介素的作用90

第十一章 淋巴系统肿瘤的基因重排和易位93

一、单克隆抗体和基因探针93

二、免疫球蛋白和T细胞受体基因96

三、淋巴系统肿瘤的基因分析97

四、单克隆性是否意味着肿瘤99

五、同时有TCR和Ig基因重排的淋巴细胞100

六、淋巴恶性疾病的TCR和Ig基因易位103

七、基因重排和易位研究的远景106

第十二章 淋巴系统肿瘤染色体易位的分子机制111

一、淋巴恶性疾病的染色体重排111

二、c-myc原癌基因112

三、断裂点分子学115

四、免疫球蛋白基因位点的作用118

五、重排的c-myc原癌基因失控118

六、重排的c-myc原癌基因调节机制119

七、体细胞杂交后重排c-myc基因的表达121

八、Burkitt淋巴瘤和肿瘤发生的多阶段性122

第十三章 免疫缺陷病的分子分析125

一、免疫球蛋白重链病的分子分析125

二、遗传性免疫缺陷病的TCR和Ig重排126

第十四章 淋巴恶性肿瘤的基因诊断129

一、白血病的诊断129

二、Southern blot技术分析淋巴细胞白血病基因重排130

三、T细胞受体基因(TCRαβγδ)检测恶性细胞克隆131

四、基因分析加免疫选择法检测残留白血病细胞132

五、PCR基因扩增法检测残留恶性细胞克隆133

六、PCR检测染色体易位者的嵌合基因133

七、PCR基因扩增TCRγ和TCRδ检测残留白血病134

八、PCR扩增Ig的CDR3区基因检测残留B细胞白血病135

第十五章 PCR体外基因扩增140

一、PCR技术的原理140

二、PCR基因扩增法的应用143

三、PCR获得双链DNA序列作为分子探针144

四、扩增DNA片段制备针对尚未克隆的基因的探针145

五、从微量的mRNA中产生cDNA文库147

六、PCR用于序列分析147

七、突变分析149

八、染色体步移(反向PCR)150

九、彩色PCR151

第十六章 分析B细胞肿瘤基因标志的PCR引物设计153

一、利用编码Ig CDR的基因作肿瘤标志153

二、免疫球蛋白CDR3区和重链基因序列中D区的关系154

三、免疫球蛋白基因PCR引物的设计原则156

四、PCR分析CDR3编码基因检测B淋巴细胞肿瘤160

一、注意事项165

附录一 多聚酶链反应(PCR)的方法学165

二、寡核苷酸引物166

三、PCR的缓冲液167

四、Taq DNA多聚酶168

五、脱氧三磷酸核苷酸168

六、靶序列169

七、扩增反应169

八、扩增由mRNA逆转录产生的DNA171

九、对PCR扩增的DNA进行序列分析173

十、靶序列的定量180

附录二 常用的基因诊断技术185

一、分子克隆的技术简介185

二、重组质粒DNA的制备187

将重组质粒转入大肠杆菌扩增187

迅速分离质粒DNA189

聚丙烯酰胺凝胶电泳191

低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法192

三、DNA制备提纯操作规程(血细胞)193

四、用微量及特殊标本制备染色体DNA194

五、非超速离心法分离细胞总RNA(酸性硫氰胍/酚/氯仿提取法)198

六、Southern blot转移200

七、DNA与同位素探针分子杂交203

八、同位素探针标记程序204

九、生物素标记探针205

十、生物素探针杂交207

十一、生物素显色系统207

二、同位素标记的原位杂交方法209

附录三 染色体原位杂交209

一、概述209

三、放射自显影210

四、生物素-染色体原位杂交212

五、实验中常见问题的讨论216

附录四 常用试剂的配制220

附录五 分子生物学实验室常规设备224

附录六 白血病PCR基因诊断试剂盒说明229