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(上册)1

第一篇 分子生物学实验方法与技术1

第一章 核酸分子探针的标记1

第一节 概述1

第二节 探针的放射性同位素标记法2

第三节 非放射性标记法7

第四节 放射性同位素标记探针的纯化7

第五节 探针比放射活性的测定8

第二章 核酸分子杂交10

第一节 概述10

第二节 DNA的Sonthen印迹杂交14

第三节 RNA的Northem印迹杂交18

第四节 斑点印迹杂交20

第五节 杂交结果的检测21

第六节 特殊杂交23

第七节 核酸原位杂交23

第三章 多聚酶链反应(PCR)29

第一节 PCR的基本原理29

第二节 PCR反应成分和作用30

第三节 PCR反应引物的设计32

第四节 PCR反应模板的制备33

第五节 耐热DNA聚合酶35

第六节 PCR反应的类型38

第七节 PCR反应产物的检测46

第八节 PCR反应的污染及对策47

第九节 PCR技术的应用49

第一节 蛋白质样品的制备和纯化55

第四章 蛋白质印迹杂交技术55

第二节 蛋白质含量的测定61

第三节 蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳64

第四节 蛋白质的转移印迹技术67

第五章 cDNA文库70

第一节 cDNA第一条链的合成70

第二节 cDNA第二条链的合成73

第三节 cDNA克隆策略81

第四节 重组子的筛选与鉴定86

第五节 人类基因组计划及cDNA克隆技术的新进展88

第六章 随机分子库技术及其在药物筛选研究中的应用95

第一节 概述95

第二节 随机分子库的构建96

第三节 随机分子库筛选技术的特点与技术流程102

第四节 应用展望108

第七章 真核基因表达调控基本原理及研究技术113

第一节 真核基因的表达调控基本原理113

第二节 基因表达调控研究技术126

第八章 外源基因在真核细胞中的表达146

第一节 哺乳动物基因转移的遗传选择标记146

第二节 外源基因导入哺乳动物细胞的载体149

第三节 外源基因导入哺乳动物细胞的方法156

第四节 基因表达产物的检测167

第九章 转基因动物178

第一节 转基因方法178

第二节 显微注射DNA的制备与纯化180

第三节 鼠的种类与饲养181

第四节 超排卵与取卵182

第五节 显微注射183

第六节 卵的转移188

第七节 转基因鼠系的建立191

第八节 卵培养液的配制与保存193

第九节 转基因动物的应用194

第十章 人类基因治疗201

第一节 基因治疗概述201

第二节 基因转移系统202

第三节 受体细胞与转移基因的表达206

第四节 人类基因治疗的审批程序209

第五节 基因标记与基因治疗209

第六节 遗传病基因治疗210

第七节 肿瘤基因治疗212

第八节 临床基因治疗概览213

第九节 伦理学安全性与社会效应215

第十节 问题与展望216

第二篇 细胞生物学实验方法与技术220

第一章 细胞培养及培养细胞增殖动力学常用方法220

第一节 细胞的原代培养220

第二节 细胞的传代培养223

第三节 培养细胞生长曲线的绘制224

第四节 分裂指数测定225

第五节 成集落实验226

第六节 细胞同步化技术227

第七节 缩时电影显微摄像术229

第八节 细胞周期分析230

第二章 器官培养方法232

第一节 表玻皿器官培养法232

第二节 不锈钢金属网格法233

第三节 Wolff培养法234

第四节 扩散盒培养法234

第三章 放射自显影术及同位素液闪测定237

第一节 培养细胞的放射自显术237

第二节 器官培养的放射自显术239

第三节 原位缺口平移技术241

第四节 同位素液闪测定243

第四章 染色体分析技术246

第一节 细胞培养246

第二节 染色体显带技术248

第五章 电镜技术255

第一节 透射电镜生物样品制备技术255

第二节 扫描电镜生物样品制备技术266

第三节 生物材料冷冻断裂蚀刻电镜技术271

第四节 扫描隧道显微镜273

第六章 细胞、细胞器及细胞间质的分离技术277

第一节 细胞的分离277

第二节 细胞膜的分离283

第三节 细胞核的分离285

第四节 溶酶体的分离286

第五节 线粒体的分离287

第六节 细胞DNA、RNA分离与纯化289

第七节 纤维粘连蛋白的提取291

第八节 层粘连蛋白的提取293

第七章 常用细胞化学染色技术295

第一节 核酸显示法295

第二节 酶显示法297

第三节 糖类与脂类显示法301

第八章 细胞凋亡研究方法概述304

第一节 细胞凋亡的形态特征及研究方法304

第二节 细胞凋亡的生化特征及研究方法304

第三节 细胞凋亡的基因调控及研究方法305

第九章 原位杂交307

第一节 原位DNA末端标记用于研究正常和异常神经组织的细胞凋亡309

第二节 原位杂交技术和PCR技术结合用于检测人乳头瘤病毒311

第三节 非放射性原位杂交--地高辛标记cDNA标记314

第四节 荧光素标记在原位杂交中的应用316

第五节 免疫组化与非放射性原位杂交双标记318

第十章 单克隆抗体制备原理及一般程序321

第一节 抗原与免疫321

第二节 细胞融合322

第三节 杂交瘤的选择与克隆323

第四节 抗体的筛选与结合试验325

第五节 单克隆抗体的产生326

第十一章 细胞骨架及核骨架制作技术328

第一节 细胞骨架的光镜制样法328

第二节 核基质中间纤维的简易整装电镜制作法329

第三节 细胞核骨架制备技术331

第四节 培养细胞整装内质网共聚焦激光扫描显微镜标本制备方法332

第一节 神经细胞培养的研究概况335

第十二章 神经细胞培养及培养细胞的实验方法335

第二节 神经细胞分散培养的基本技术336

第三节 培养神经细胞蛋白总量的流式分析339

第四节 培养神经细胞的电特性测定341

第五节 培养神经细胞的免疫组化研究技术348

附录：353

一、常用平衡盐溶液的配制353

二、鼠尾胶原的制作353

三、小鸡血浆的制备354

四、鸡胚提取液的制备354

五、显影液的配制354

六、定影液的配制355

九、液体乳胶附加液配制356

八、封片明胶液配制356

七、停影液的配制356

第三篇 信息传递的研究方法和技术357

第一章 受体配基结合实验技术357

第一节 受体-配基相互作用概述357

第二节 受体-结合实验的理论基础358

第三节 实验技术373

第二章 G蛋白分离纯化技术387

第一节 G蛋白纯化技术387

第二节 G蛋白活性的检测技术396

第三章 环核苷酸测定技术399

第一节 cAMP蛋白质竞争结合法399

第二节 cGMP的放免测定405

第三节 腺苷酸环化酶的测定技术409

第二节 生物测定法414

第四章 花生四烯酸代谢产物的测定方法414

第一节 概述414

第三节 高效液相测定法418

第四节 放射免疫分析法(RIA)420

第五节 酶免疫测定法(EIA)425

第六节 放射配基受体结合法(RRA)427

第五章 肌醇磷脂及其代谢产物的测定技术430

第一节 概说430

第二节 同位素标记法测定肌醇磷脂及其代谢产物及PLC活性测定431

第三节 特异受体结合法定量测定1，4，5IP3434

第六章 磷酸标记技术测定受体酪氨酸激酶437

第一节 确认受体酪氨酸激酶的标准437

第二节 证实RTK的研究战略438

第三节 完整细胞及无细胞体系的32P标记439

第七章 PKC的纯化及活性测定443

第一节 PKC的提取及纯化443

第二节 PKC活性的测定445

第八章 离体器官受体的生物测定447

第一节 豚鼠回肠纵肌测定阿片受体配基447

第二节 其它离体组织生物测定450

第九章 间隙连接介导的细胞间通讯的研究方法和技术452

第一节 细胞间隙连接通讯新进展概述452

第二节 细胞间隙连接通讯功能研究方法与技术454

第三节 细胞间隙连接结构研究方法与技术460

第四节 细胞间隙连接通讯研究方法和技术在药物研究中的应用和实验设计468

第一章 概述471

第一节 钙的化学及生化特性471

第四篇 钙研究方法与技术471

第二节 细胞内钙的生理作用及其调节472

第三节 细胞内钙的调节472

第四节 细胞内钙超载473

第五节 细胞内游离钙的测定473

第二章 细胞内游离钙的研究方法与技术476

第一节 钙指示剂476

第二节 双波长荧光分光光度计测定方法479

第三节 单细胞内游离钙测定方法482

第四节 单细胞内游离钙图象处理测定方法487

第三章 钙结合蛋白研究方法492

第一节 钙调素的纯化及测定492

第二节 钙调素结合蛋白的检测方法496

第三节 钙调素表达与突变的研究方法497

第四节 钙依赖性磷脂结合蛋白研究方法502

第四章 钠-钙交换研究方法509

第五章 钠-钾ATP酶和钙泵的活性测定513

第六章 细胞内钙释放研究方法517

第一节 放射性标记法测定内钙释放517

第二节 IP3刺激内钙释放的研究方法519

第七章 钙离子受体测定方法522

第五篇 放射配体受体结合实验方法与技术526

第一章 概述526

第一节 判断受体的标准526

第二节 受体的调节机制527

第三节 放射配体结合法的应用和前景529

第一节 引言531

第二节 放射配体的选择531

第二章 放射受体结合法531

第三节 组织的选择和制备532

第四节 缓冲液和佐剂533

第五节 非特异性结合测定533

第六节 孵育条件534

第七节 放射配体-受体复合体与游离放射配体的分离536

第八节 饱和动力学研究的设计537

第九节 竞争性结合数据计算540

第十节 受体结合测定中容易出现的问题542

第十一节 Exvivo和在体结合技术542

第十二节 小结543

第一节 胆碱受体配体结合实验546

第三章 受体-配体结合实验举例546

第二节 豚鼠离体回肠实验551

第三节 烟碱样受体-配体结合实验552

第四节 a1·a2肾上腺素能受体结合实验553

第五节 β肾上腺素受体结合实验555

第六节 D1受体结合和药物竞争试验556

第七节 D2受体结合和药物竞争试验557

第八节 5-HT受体-配体结合实验558

第九节 “中枢型”苯二氮？受体-配体结合实验559

第十节 苯二氮？受体与〔3H〕FNZP的光亲和标记实验560

第十一节 “外周型”苯二氮？受体-配体结合实验560

第十二节 γ-氨基丁酸(GABA)受体-配体结合实验561

第十三节 氧离子通道开放实验562

第十四节 吗啡受体-配体结合实验562

第十五节 组织胺H1受体-配体结合实验563

第十六节 1，4-双氢吡啶(DHP)钙通道受体-配体结合实验564

第十七节 雌激素受体的测定566

第十八节 孕激素受体的测定568

第十九节 雄激素受体的测定569

第二十节 糖皮质激素受体的测定571

第廿一节 GnRH受体的测定573

第廿二节 绒毛膜促性腺激素受体的测定574

附：胞浆蛋白含量测定575

第四节 疾病与受体577

第一节 概述577

第二节 精神分裂症579

第三节 抑郁症580

第四节 帕金森综合征581

第五节 老年性痴呆症582

第六节 舞蹈病583

第七节 癫痫584

第八节 疼痛585

第九节 高血压587

第十节 麻醉588

第六篇 神经递质、肽、神经营养因子的研究方法与技术591

第一章 神经递质和神经肽的研究方法与技术591

第一节 突触小体制备及突触体对单胺递质摄取的测定591

第二节 血小板对5-羟色胺的摄取597

第三节 一种体内持续给药方法-向量透析泵602

第四节 脑透析术-测定神经递质和神经肽释放的一种新技术606

第五节 HPLC-EC检测单胺类神经递质及其代谢产物611

第六节 HPLC-RE-ECD检测乙酰胆碱620

第七节 放射受体分析法测定配体及肽类物质623

第二章 神经营养因子的研究方法与技术628

第一节 前言628

第二节 神经营养因子的获取628

第三节 神经营养因子体外生物活性检测631

第四节 神经营养因子基因表达研究634

第五节 神经营养因子对神经再生的作用639

第七篇 免疫药理学实验方法与技术642

第一章 免疫药理学概述642

第二章 免疫细胞的分离与纯化644

第一节 血液或组织标本的采集644

第二节 外周血液中白细胞的分离646

第三节 外周血液中单个核细胞的分离--密度梯度离心法647

第四节 从淋巴组织中分离淋巴细胞悬液649

第五节 淋巴细胞的分离屯化650

第六节 人外周血树突状细胞的分离与体外培养659

第七节 小肠上皮细胞间淋巴细胞的分离660

第八节 各种细胞分离技术综合评价664

第三章 T淋巴细胞克隆技术和T淋巴细胞克隆在免疫药理学中的应用668

第一节 T淋巴细胞克隆基本原则和要求668

第二节 T淋巴细胞克隆基本方法669

第三节 T淋巴细胞克隆的鉴定675

第四节 T淋巴细胞克隆在免疫药理学中的应用676

第四章 药物对免疫细胞表面抗原分子影响的研究680

第一节 表达在免疫细胞表面上的CD抗原分子680

第二节 免疫细胞表达抗原分子的免疫荧光染色分析689

第三节 免疫荧光染色分析在免疫药理学研究中的应用699

第五章 药物对免疫细胞功能影响的研究701

第一节 药物对免疫细胞增殖反应影响的研究701

第二节 淋巴细胞功能的体内实验检测705

第三节 细胞毒T淋巴细胞毒功能的检测709

第四节 淋巴细胞活化时信号传导的检测方法715

第五节 淋巴细胞细胞毒反应的检测实验719

第六节 细胞因子及其受体的实验检测726

第七节 药物对B细胞影响的体内外实验736

第六章 药物对单核巨噬细胞及抗原呈递细胞功能影响的实验检测741

第一节 药物对单核巨噬细胞功能影响的实验检测743

第二节 药物对抗原呈递细胞呈递抗原作用的实验检测745

第七章 药物对超敏反应影响的体内外实验检测750

第一节 药物对第I型超敏反应影响的体内外实验检测750

第二节 药物对第II～IV型超敏反应影响的体内外实验检测762

第八章 药物的肿瘤免疫学研究方法767

第一节 淋巴细胞杀瘤活性测定768

第二节 LAK细胞的制备768

第三节 肿瘤浸润淋巴细胞的制备769

第四节 混合淋巴细胞--肿瘤培养772

第五节 实验动物肿瘤抗原的制备与检测774

第六节 肿瘤抗原负载的树突状细胞的肿瘤免疫学体内研究778

第七节 转基因技术在肿瘤免疫研究中的应用780

第九章 抗体工程实验技术795

第一节 细胞工程抗体实验技术795

第二节 基因工程抗体实验技术803

第十章 免疫药理学的药物研究策略816

第一节 免疫促进剂和免疫调节剂的免疫药理学研究策略816

第二节 免疫抑制剂的免疫药理学研究策略817

第八篇 肿瘤药理实验方法与技术818

第一章 细胞毒类药物818

第一节 体外实验方法818

第二节 动物肿瘤体内筛选法824

第三节 抗癌药作用机理研究方法826

第二章 生物反应调节剂839

第一节 体内抗癌试验的方法839

第二节 免疫功能的研究方法840

第三章 分化诱导剂857

第一节 细胞形态学及组织化学研究方法857

第二节 细胞功能的研究方法859

第三节 与分化有关的基因及其表达的研究方法863

第四章 化学预防药865

第一节 体外诱导细胞转化的方法866

第二节 体内诱癌试验871

第三节 化学预防剂作用机理的研究872

附：胃癌变动物模型878

第五章 逆转肿瘤耐药性药物887

第一节 肿瘤细胞耐药表型和机制887

第二节 肿瘤耐药细胞株的建立及鉴定892

第三节 多药耐药基因及其表达产物的测定方法895

第四节 寻找肿瘤耐药性逆转剂的方法916

第六章 抗肿瘤侵袭、转移药物的实验方法925

第一节 肿瘤侵袭、转移与实验方法概述925

第二节 肿瘤侵袭、转移的实验动物模型926

第三节 肿瘤侵袭的体外模型及侵袭相关的生物学特性研究932

第四节 新血管生成的研究方法940

附：LA-795自发肺癌实验转移模型943

第七章 放疗及化疗增敏剂952

第一节 放射增敏剂的正名、定义及其研究特点952

第二节 离体细胞培养实验技术953

第三节 整体动物实验技术960

第九篇 糖尿病药理实验方法与技术981

第一章 糖尿病及有关并发症的动物模型981

第一节 类似I型糖尿病的动物模型981

第二节 类似II型糖尿病的动物模型984

第三节 糖尿病动物的并发症986

第二章 糖尿病离体实验989

第一节 糖代谢实验989

第二节 醛糖还原酶(AR)及多元醇途径992

第三节 胰岛细胞培养995

第三章 生化测定及病理检查1000

第一节 血糖与血脂测定1000

第二节 糖基化蛋白测定1003

第三节 糖原合成与糖异生测定1006

第四节 胰岛素测定1008

第五节 胰岛素受体测定1009

第六节 神经传导速度测定1010

第七节 血液及尿中NAC酶测定1010

第八节 血及肝中膜脂质过氧化产物及超氧化物歧化酶测定1012

第九节 红细胞膜Na+-K+-ATP酶测定1015

第十节 胰岛、肾、神经视网膜及晶体病理变化的光镜及电镜观察1017

第二节 常用的动物学习记忆实验方法1020

第一节 概述1020

第十篇 行为药理实验方法与技术1020

第一章 学习、记忆实验法和记忆障碍动物模型1020

第三节 记忆障碍动物模型1029

第四节 给药方案对结果的评价及有关问题1031

第二章 学习记忆的电生理研究方法-突触传递长时程增强(LTP)现象1033

第一节 LTP研究概况1033

第二节 在整体脑内记录LTP的方法1036

第三节 在脑片上记录LTP的方法1039

第三章 抗焦虑药理实验方法1047

第一节 概述1047

第二节 现有抗焦虑药物类型1047

第三节 抗焦虑实验方法及模型1048

第一节 概述1061

第四章 抗抑郁药理实验方法1061

第二节 现有抗抑郁药的类型1062

第三节 实验方法和模型1062

第五章 药物依赖性动物试验方法1072

第一节 阿片类药物的身体依赖性实验方法1073

第二节 镇静催眠药的身体依赖性试验方法1081

第三节 药物的精神依赖性评价方法1084

第四节 化学分析方法在阿片类滥用诊断中的应用1093

第十一篇 时间药理学实验方法1100

第一章 生物节律与时间药理学1100

第一节 生物节律的特征参数1100

第二节 生物节律的基本概念1101

第三节 生物节律与药物作用的时间节律性1102

第一节 时间药理学研究的主要内容1103

第二章 时间药理学研究内容及研究方法1103

第二节 时间治疗学研究内容1104

第三节 时间药理学研究方法概要1104

第三章 时间药理学研究的特殊性1106

第一节 时间药理学研究中的“时间”问题1106

第二节 实验动物种属的影响1106

第三节 实验观察指标及部位影响1107

第四节 药物方面因素的影响1108

第四章 时间生物医学技术在时间药理学中的应用1114

第一节 动物行为自动监测仪1114

第二节 体温节律自动监测装置1117

第三节 连续心血管功能监测仪1119

第四节 呼吸连续监测仪1120

第五节 程序化药物泵1121

第五章 时间药理学实验数据处理及统计分析1123

第一节 时间药理学实验数据取样原则1123

第二节 常用节律分析方法及其选用1125

(下册)1133

第十二篇 抗血栓形成及相关研究方法与技术1133

第一章 血管内皮细胞1133

第一节 血管内皮细胞培养1133

第二节 内皮细胞分泌的活性物质测定1137

第三节 白细胞与内皮细胞的粘附1145

第二章 有关血小板研究的实验方法1148

第一节 血小板的制备方法1148

第二节 血小板的生成时间检测1149

第三节 血小板功能实验1150

第四节 影响血小板功能的几种途径检测1158

第五节 血小板膜糖蛋白测定1167

第六节 血小板相关抗体检测1169

第三章 有关凝血因子及凝血机理的实验1171

第一节 内源性凝血途径实验1171

第二节 外源性凝血途径实验1178

第三节 凝血第三阶段实验1182

第四章 抗凝物质检查1186

第一节 生理性抗凝物质检测1186

第二节 病理性抗凝物质检测1197

第五章 纤维蛋白溶解系统检测1200

第一节 纤溶活性检测1200

第二节 纤溶蛋白单体检测1205

第三节 纤维蛋白(原)降解产物检测1206

第一节 血栓弹力图法1212

第六章 血栓形成相关的流变学测定方法及有关在体实验1212

第二节 体外血栓仪法1213

第三节 凝血的旋转剪应力测定法1214

第四节 电刺激动脉血栓形成法1215

第五节 动-静脉旁路血栓形成法1216

第六节 光化学诱导脑梗塞模型1217

第七节 血瘀证的动物模型研究1218

第十三篇 抗氧化及自由基实验方法与技术1220

第一章 机体氧化及抗氧化系统测定法1220

第一节 酶活性测定法1220

第二节 氧化还原性物质含量测定1225

第二章 药物体内抗氧化研究1231

第一节 药物抗氧化作用类型及测定指标1231

第二节 动物模型和给药方法1232

第三章 自由基产生系统1233

第四章 自由基测定方法1236

第五章 脂质过氧化1238

第一节 脂质过氧化1238

第二节 检测方法1238

第十四篇 抗脑缺血及动脉粥样硬化的实验方法与技术1240

第一章 脑缺血模型1240

第一节 体内模型1240

第二节 体外模型-大鼠胎鼠皮层神经细胞的原代培养1246

第二章 蛛网膜下腔出血模型1248

第一节 蛛网膜下腔直接注血法1248

第二节 预内动脉(颅内段)破损法1249

第三节 氢清除法测定局部脑血流量1250

第三章 脑缺血生化测定1252

第一节 脑能量代谢1252

第二节 脑细胞外液嘌呤代谢物和羟自由基的测定1255

第三节 脑突触体前膜谷氨酸释放的测定1257

第四章 动脉粥样硬化实验模型1259

第一节 动脉粥样硬化模型的复制1259

第二节 动脉粥样硬化模型的病理形态学观察1263

第五章 动脉粥样硬化的生化测定1272

第一节 血脂测定1272

第二节 脂蛋白的分离和测定1280

第三节 载脂蛋白的测定1290

第四节 脂蛋白代谢有关酶活性的测定1298

第五节 脂质过氧化物及有关酶活性的测定1305

第六节 脂蛋白受体功能的测定1309

第一节 几种有关细胞的培养实验1314

第六章 抗动脉粥样硬化研究的细胞培养实验1314

第二节 有关细胞的功能性实验1318

第三节 泡沫细胞模型的建立1322

第四节 有关因子及基因表达实验1324

第十五篇 抗衰老及痴呆的研究方法与技术1334

第一章 Alzheimer型痴呆淀粉样变蛋白前体转基因模型1334

第一节 动脉模型和转基因模型的基本概念1334

第二节 APP转基因模型的理论基础1335

第三节 APP转基因小鼠AD模型研究现状1339

第四节 APP转基因小鼠AD模型存在的问题1340

第五节 总结与展望1341

第一节 概述1344

第二章 寿命试验方法1344

第二节 果蝇试验1345

第三节 鹌鹑试验1347

第四节 小鼠试验1348

第五节 大鼠试验1349

第六节 家蚕试验1349

第七节 隆腺蚤试验1350

第八节 二倍体细胞寿命试验1351

第三章 衰老对代谢及相关酶影响的实验方法1353

第一节 血清总抗氧化活性测定1353

第二节 过氧化脂质测定1354

第三节 脂褐素测定1355

第四节 超氧化物歧化酶活性测定1356

第五节 单胺氧化酶活性测定1357

第六节 全血胆碱酯酶活性测定1359

第七节 血清中铜蓝蛋白氧化酶活性测定1361

第八节 脑细胞Na+-K+-ATP酶活性测定1361

第九节 羟脯氨酸测定1363

第十节 红细胞膜唾液酸含量测定1363

第十一节 核酸代谢测定1364

第四章 衰老免疫学方法1366

第一节 衰老免疫学一般概念1366

第二节 IL1-4的检测方法1367

第三节 白细胞介素-6表达的测定方法1371

第四节 神经白细胞素的检测方法1376

第五节 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的测定方法1378

第一节 急性炎症1382

第一章 抗炎及抗过敏实验方法与技术1382

第十六篇 抗炎、抗过敏及肝损伤实验方法与技术1382

第二节 亚急性和慢性炎症1383

第三节 过敏性炎症1384

第四节 炎症介质测定方法1385

第二章 实验性肝损伤体内模型1397

第一节 小鼠急性化学性肝损伤模型1397

第二节 大鼠四氯化碳慢性肝损伤模型1398

第三节 小鼠免疫性肝损伤模型1400

第三章 肝纤维化的体外模型及肝纤维化有关的肝间质细胞培养1401

第十七篇 抗菌、抗病毒药物的实验方法与技术1409

第一章 抗菌药物的实验方法与技术1409

第一节 体外抗菌实验1409

第二节 全身感染模型1415

第三节 局部感染模型1417

第二章 抗病毒药物的实验方法与技术1425

第一节 体外实验法1425

第二节 体内实验法1452

第十八篇 激素的研究方法与技术1471

第一章 激素的组织分布研究方法1471

第一节 激素分布的免疫细胞化学分析1471

第二节 激素分布的放射自显影分析1483

第二章 激素的测定方法1498

第一节 引言1498

第二节 激素的体内生物测定法1499

第三节 激素的体外生物测定法1505

第四节 激素的放射受体分析法1508

第五节 激素的竞争性蛋白结合分析法1509

第六节 激素的放射免疫分析法1511

第七节 激素的免疫放射量度分析法1517

第八节 激素的酶免疫分析法1519

第九节 激素的荧光免疫分析法1522

第十节 激素的化学发光免疫分析法1524

第十一节 激素的羰基金属免疫分析法1525

第十二节 激素的胶体金交联单抗分析法1527

第十三节 激素的高效液相色谱分析法1528

第三章 激素与受体作用研究方法1531

第一节 激素与细胞膜受体--丝氨酸／苏氨酸磷酸化系统作用1532

第二节 激素与细胞膜受体--酪氨酸磷酸化系统作用1541

第三节 激素与细胞内受体作用1548

第四章 激素的重组DNA技术1576

第一节 激素蛋白在原核细胞中的表达1577

第二节 激素蛋白在真核细胞中的表达1589

第十九篇 药物代谢实验方法和技术1597

第一章 药物及其代谢产物自生物样品中的分离方法1597

第一节 薄层色谱法1597

第二节 气相色谱法1600

第三节 高效液相色谱法1604

第二章 药物及其代谢产物的测定方法1612

第一节 紫外一可见分光光度法1612

第二节 荧光分光光度法1615

第三章 同位素示踪技术在药物代谢研究中的应用1620

第一节 概述1620

第二节 同位素在药物中研究中的应用范围1622

第一节 原理简介1637

第四章 串联质谱在药品及其代谢产物分析中的应用1637

第二节 定性分析1639

第三节 定量分析1640

第五章 细胞色素P450酶系(P450s)的研究1643

第一节 P450s的研究现状1643

第二节 P450s的分离、纯化及鉴定1643

第三节 P450含量测定1647

第四节 NADPH细胞色素P450还原酶活性的测定1649

第五节 常用P450s的诱导方法1649

第六章 细胞色素P450同功酶活性的测定1651

第一节 二甲基亚硝胺脱甲基酶活性测定1651

第二节 红霉素脱甲基酶活性测定1652

第三节 7-乙氧基(戊氧基)香豆素脱烃酶活性测定1652

第四节 睾丸酮羟化酶活性测定(HPLC法)1653

第七章 药物代谢II相酶研究1656

第一节 谷胱甘肽巯基转移酶活性测定1656

第二节 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDPGT)活性测定1657

第八章 几种常见的代谢过程酶活性的测定1659

第一节 氮-脱烃1659

第二节 氧-脱烃1659

第三节 芳香环加羟1660

第四节 环氧化物水化作用1661

第九章 利用肝脏标本的研究方法1663

第一节 肝切片技术1663

第二节 离体肝脏灌流法1664

第一节 平衡透析法1669

第十章 药物与血浆蛋白结合的研究方法1669

第二节 超过滤法1672

第三节 快速或动力透析法1674

第四节 分配平衡法1675

第五节 凝胶过滤法1676

第六节 光谱分析法1677

第十一章 临床药代动力学1680

第一节 房室模型概念1680

第二节 静脉滴注的药代动力学1681

第三节 药代动力学和药效动力学结合模型1686

第四节 生物利用度有关参数1690

第五节 生物样本分析方法的认证1697

第一章 女用节育药研究方法和技术1699

第一节 抗早孕、抗着床和抗生育药筛选方法1699

第二十篇 计划生育药物研究方法与技术1699

第二节 药物抗排卵活性的测定1700

第二章 性激素和促性腺激素的生物测定1701

第一节 雌激素生物活性测定1701

第二节 孕激素生物活性测定1701

第三节 雄激素生物活性测定1703

第四节 促性腺激素生物活性测定1703

第三章 影响卵巢黄体功能药物的研究方法1705

第一节 黄体细胞体外培养1705

第二节 腺苷酸环化酶活性测定1705

第三节 △5-3β羟甾脱氢酶活性测定1706

第一节 宫颈张力测定1708

第二节 宫颈胶原酶活性测定1708

第四章 影响宫颈成熟药物的研究方法1708

第三节 宫颈羟脯氨酸含量测定1710

第五章 垂体卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)含量测定1712

第一节 FSH和LH的碘标记法1712

第二节 RRA法测垂体FSH和LH含量1713

第三节 RIA法测垂体FSH和LH含量1713

第六章 男性节育药物的研究方法和技术1715

第一节 抗雄性生育药的筛选方法1715

第二节 精子穿卵实验1716

第三节 间质细胞液和曲细精管液中睾酮的测定1718

第四节 促黄体生成素(LH)对睾丸功能的影响1718

第五节 附睾微穿刺实验方法1719

第六节 附睾管微灌流实验方法1719

第七节 精浆肉毒碱含量的测定1720

第八节 精浆a糖苷酶含量的测定1721

第九节 唾液酸含量的测定1722

第二十一篇 电生理实验方法1724

第一章 电生理学技术的基本原理1724

第一节 概述1724

第二节 电生理实验常用仪器1725

第三节 玻璃电极的拉制1736

第四节 电生理实验中噪声和干扰的形成及排除1739

第五节 电子计算机在电生理实验中的应用1743

第二章 细胞外记录技术1753

第一节 心肌细胞外单相动作电位记录技术1753

第二节 中枢神经系统细胞外记录技术1760

第三章 细胞内微电极记录技术1766

第一节 神经细胞内记录技术1766

第二节 心肌细胞内记录技术1773

第四章 电压钳制技术1783

第一节 蔗糖间隙法电压钳制技术1784

第二节 微电极电压钳制技术1786

第五章 膜片钳技术原理及方法1790

第一节 膜片钳技术基本原理1790

第二节 电流记录方法1794

第六章 电生理的其它实验方法1800

第一节 慢钙依赖性钾介导的后超极化(AHP)1800

第二节 频率强化(FP)1801

第三节 神经纤维传导速度测定1804

第四节 有髓神经纤维的数目和密度测定1806

第一节 药物毒理学方法总论1810

第一章 药物毒性一般测试方法1810

第二十二篇 毒理学实验方法与技术1810

第二节 急性毒性实验(近似LD50测定法)1814

第三节 急性毒性实验(LD50测定法)1818

第四节 大鼠和狗长期毒性实验1821

第二章 基因突变和DNA损伤检测方法1828

第一节 鼠伤寒沙门菌回复突变实验1828

第二节 果蝇伴性阴性致死实验1840

第三节 小鼠特异位点示实验1848

第四节 SOS显色实验1853

第三章 染色体突变检测方法1864

第一节 哺乳动物培养细胞染色体间畸变实验1864

第二节 哺乳动物骨髓细胞染色体间畸变实验1877

第三节 小鼠显性致死实验1881

第四节 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验1886

第五节 外周血嗜多染红细胞微核实验1893

第四章 原代肝细胞在现代遗传毒性测试中的应用1900

第一节 遗传毒性评价--目的和方法1900

第二节 遗传毒性测试中代谢的重要性1900

第三节 大鼠原代肝细胞／肝细胞分离技术的应用1901

第四节 结束语1924

第五章 生殖和发育毒性实验1932

第一节 一般生殖毒性(第I段)实验1932

第二节 致畸实验(第II段实验)1949

第三节 围产期(第III段)实验1969

第二十三篇 核磁共振技术在药理学研究中的应用1980

前言1980

第一节 部分原子核的磁性质1982

第一章 核磁共振技术简介1982

第二节 简单原理1983

第三节 核磁共振测量参数1984

第二章 生物样品核磁共振测定中的几种常用技术1990

第一节 脉冲同核去偶技术1990

第二节 异核去偶技术1990

第三节 门控同核去偶技术1991

第四节 自旋回波(spin echo)技术1992

第五节 表面线圈技术1993

第六节 顺磁探针与位移试剂1994

第三章 生物样品的波谱分析1995

第一节 氢谱分析1995

第二节 碳谱分析1995

第三节 磷谱分析1999

第四节 氟谱分析2001

第五节 氮谱分析2002

第四章 NMR药理学研究的有关实验技术2004

第一节 样品或标本制备2004

第二节 NMR测定细胞内pH2005

第三节 细胞内离子浓度测定2007

第四节 组织血流与血管容积测定2010

第五节 组织中氧张力和组织温度测定2012

第五章 NMR研究心肌代谢与药理作用2014

第一节 心肌能量代谢研究2014

第二节 心肌离子转运研究2016

第三节 心肌糖代谢研究2019

第四节 心脏病治疗作用研究2023

第一节 脑代谢与脑功能关系研究2035

第六章 NMR研究脑代谢药物作用2035

第二节 脑缺血研究2037

第三节 脑外伤与脑水肿研究2041

第七章 NMR研究药物与生物大分子的相互作用2046

第一节 药物与蛋白质结合作用2046

第二节 研究药物与核酸作用2056

第三节 研究药物与膜脂作用2062

第八章 药物毒物代谢处置的NMR研究2072

第一节 1H-NMR2072

第二节 2H-NMR2076

第三节 7Li-NMR2077

第四节 13C-NMR2077

第五节 19F-NMR2079

第六节 31P-NMR2088

第二十四篇 磷脂测定方法及其在药理学研究中的应用2097

第一章 组织磷脂的提取2097

第一节 提取脂质的一般原理2097

第二节 氯仿--甲醇混合溶剂提取法2097

第三节 己烷--异丙烷混合溶剂提取法2098

第四节 磷脂与中性脂的分离2099

第五节 脂质提取物的储存2099

第二章 不同种类磷脂的分离，提纯和定量分析2101

第一节 柱色谱(column chromatography)方法2101

第二节 薄层色谱方法2102

第三节 高效液相色谱方法2105

第四节 磷脂含量测定2107

第二节 1，2-diradylglycerol衍生物的形成2109

第一节 缩醛磷脂的酸性水解2109

第三章 磷脂亚类的纯化和定量分析2109

第三节 分离磷脂亚类的薄层色谱和高压液相色谱方法2110

第四节 放射性同位素标记方法2110

第五节 不同磷脂分子种属的分离2112

第四章 气相色谱方法测定磷脂脂肪酸组成、缩醛和烃基链的含量2116

第一节 脂肪酸甲酯的测定2116

第二节 二甲基缩醛的测定2116

第三节 烃基链的测定2118

第五章 磷脂分析在药理学研究中的应用2119

第一节 概述2121

第二节 基本原理2121

第一章 一氧化氮及其合成酶的研究方法与技术2121

第二十五篇 一氧化氮、一氧化碳及其合成酶的研究方法与技术2121

第三节 生化测定技术2123

第四节 形态学方法2129

第五节 药理学方法2133

第六节 一氧化氮及其合成酶的荧光检测2134

第七节 用高效液相色谱法测定一氧化氮及其合成酶的活性2138

第二章 一氧化碳及其合成酶的研究方法与技术2144

第一节 CO产生的生物来源和调控方法2144

第二节 CO的测定技术2146

第三节 血红素氧合酶(HO)的测定技术2148

第四节 CO的药理作用观察方法2150

第二十六篇 兴奋剂检测方法及技术2155

第一章 刺激剂类药物2155

第一节 刺激剂的药理作用和毒副作用2155

第二节 刺激剂的检测方法2158

第三节 分析条件2160

第四节 定量分析2166

第五节 结果与讨论2169

第二章 麻醉镇痛剂和β受体阻断剂2173

第一节 麻醉镇痛剂2173

第二节 β受体阻断剂2174

第三节 麻醉镇痛剂与β阻断剂的分析研究2175

第三章 合成类固醇激素2184

第一节 类同醇激素的药理作用和毒副作用2184

第二节 同化激素的滥用与禁用2184

第三节 检查方法2185

第一节 利尿剂的高效液相色谱筛选2197

第四章 利尿剂及丙磺舒2197

第二节 尿样的常规检测2202

第三节 咖啡因的含量测定2203

第二十七篇 药物化学结构与药理活性的关系2205

第一章 引言2205

第二章 药物--生物大分子相互作用力2207

第一节 共价键2207

第二节 离子键2209

第三节 离子--偶极键2210

第四节 偶极--偶极健2211

第五节 氢键2211

第六节 电荷转移键2211

第七节 疏水作用2213

第八节 范德华引力2214

第一节 药物的化学结构对吸收的影响2215

第三章 药物的化学结构与药代动力学2215

第二节 药物的化学结构对分布的影响2218

第三节 药物的化学结构与蛋白结合的关系2219

第四节 药物的化学结构与药物代谢2219

第四章 药物的化学结构与毒理学2228

第五章 药物的化学结构与药理活性2230

第一节 药效团2230

第二节 药物的立体化学和生物活性2236

第三节 构象与药理活性2239

第六章 定量构效关系2244

第一节 定量构效关系的定义和研究范围2244

第二节 定量构效关系模型2244

第三节 统计学处理2254

第四节 定量构效关系举例2255

第五节 三维定量构效关系2258

第二十八篇 计算机在药理学中的应用2259

第一章 计算机的一般知识2259

第一节 硬件软件-计算机的两大支柱2259

第二节 常用的工具软件2262

第三节 文字处理及编辑排版系统2263

第四节 数据库处理系统2265

第五节 计算机病毒的防治2266

第二章 药理实验室中计算机的应用2268

第一节 计算机文献检索2268

第二节 计算机辅助的药理实验设计2270

第三节 实验室数据的自动化观测2270

第四节 计算机模拟实验2270

第五节 实验数据的处理及图表制作2271

第六节 论文写作编辑2272

第三章 计算机在药代动力学中的应用2273

第一节 概述2273

第二节 药代动力学应用程序2273

第四章 药效统计分析及应用软件2276

第一节 SAS软件2276

第二节 SYSTAT软件2278

第三节 新药数据的统计处理及NDST程序2279

第五章 计算机在临床药理学中的应用2281

第一节 药物临床实验的数据分析2281

第二节 治疗药物监测2281

第三节 临床药物学数据库的开发2281

第五节 计算机专家系统2282

第四节 计算机控制给药系统2282

第六章 计算机在药理教学中的应用2284

第一节 药理学实验教学计算机模拟系统2284

第二节 图文演示系统2284

第三节 药理学考试系统2285

第二十九篇 基于受体结构的药物分子设计2286

第一章 引言2286

第二章 基于分子结构的分子设计战略2292

第三章 基于结构的分子设计过程2295

第四章 设计循环的主要方法2298

附录2309

1. 汉英专业词汇索引2309

2. 英汉专业词汇索引2354

3. 作者索引2399