《动物组织培养技术及其应用》求取 ⇩

第一章绪论1

（三）冰箱10

（六）显微镜10

（五）水质纯化装置10

（四）清洗装置10

（一）原代培养100

（二）细胞系的演化100

（三）连续细胞系101

三、生长曲线101

四、分化102

主要参考文献104

第十一章组织培养方法的发展105

主要参考文献107

一、大规模细胞体外培养系统的基本要求109

（一）新型培养系统的设备109

第十二章动物细胞的大规模离体培养技术109

三、实验室应用的器具11

（一）组织培养中常用的金属器具11

（八）酸度计11

（十）其他11

（九）真空泵11

（七）离心机11

（三）培养液的选择110

（二）细胞株（系）的选择110

（四）细胞生长状况的监测110

二、几种大规模细胞培养系统111

（一）气升式深层培养系统111

（三）微囊培养系统112

（二）微载体培养系统112

（四）大载体培养系统113

（五）中空纤维培养系统115

（二）干扰素118

（三）单克隆抗体118

（一）疫苗118

三、大规模细胞培养技术的应用118

主要参考文献119

（四）基因重组产品119

（二）玻璃器皿和塑料器皿12

一、生长晕的测量120

第十三章细胞生长指标的测定120

三、细胞计数121

二、有丝分裂指数的计算121

四、生长周期的检测122

五、细胞周期123

主要参考文献124

六、细胞DNA的测定124

第十四章显微缩时电影125

一、连续灌注培养小室125

二、倒置相差显微镜和保温装置125

三、显微缩时电影仪125

四、拍摄步骤126

主要参考文献127

（一）离心洗脱法128

一、各期细胞的分离128

第十五章细胞同步化128

（二）细胞分类拣选法129

（三）梯度沉降法129

（二）异亮氨酸饥饿法130

二、G1/S期细胞的分离130

（一）血清饥饿法130

（一）震摇脱落法131

三、M期细胞的分离131

（四）胸腺嘧啶核苷阻断法131

（三）精氨酸饥饿法131

（五）其他131

（三）秋水仙素阻抑法132

主要参考文献132

（二）胰蛋白酶分离法132

一、化学诱变剂133

第十六章突变型细胞133

二、CHO突变型细胞系列134

三、HeLa突变型细胞系列138

（三）辅助工具类14

主要参考文献140

（一）活细胞观察141

（二）固定染色观察培养细胞141

第十七章细胞系的鉴定及其特征（一）141

一、形态学141

二、染色体142

（一）染色体数目和核型分析143

（二）染色体分带技术145

三、同工酶谱系147

（一）同工酶酶谱检测147

主要参考文献15

（二）同工酶酶谱在细胞培养中的应用151

主要参考文献154

（一）软琼脂细胞群落形成法的基本步骤155

第十八章细胞系的鉴定及其特征（二）155

一、软琼脂细胞群落形成法155

（二）软琼脂法的应用156

二、细胞特异表达功能的检测157

三、细胞DNA遗传特征的检测158

主要参考文献159

一、纯净水的制备16

第三章 清洗、包装、消毒16

第十九章基因转染技术160

一、方法160

（一）磷酸钙沉淀法160

（二）DEAE-dextran法164

（三）原生质体融合法164

（四）仙台病毒被膜重建法167

二、应用169

（一）玻璃器皿类的清洗和包装17

二、清洗和包装17

主要参考文献170

一、玻璃毛细管的制备171

第二十章组织培养细胞的显微注射法171

二、培养细胞172

三、注射样品172

四、显微注射172

主要参考文献173

一、细胞、组织样品的制备174

（一）盖玻片和载玻片的预处理174

第二十一章原位杂交技术174

（二）固定175

（三）标本的制作176

二、探针的制备和标记176

（一）探针的制备176

（二）探针的标记177

三、杂交反应182

（一）杂交前的预处理步骤183

（三）杂交反应后去除非专一性结合184

（二）杂交反应步骤184

四、杂交结果的检测185

（一）放射自显影术185

（二）生物索标记探针的追踪和检测186

主要参考文献189

（二）螺旋盖的清洗和包装19

（四）橡皮管的清洗19

（五）砂芯玻璃过滤器的清洗19

（三）橡皮帽和橡皮塞的清洗19

（六）去污剂的选择19

第二十二章放射自显影术190

一、基本原理——径迹形成原理190

二、放射自显影术的分辨率和效率190

三、标记物190

四、培养细胞标本的制备192

五、光学显微镜自显影193

六、放射自显影术在组织培养中的应用194

主要参考文献194

一、仪器的工作原理196

第二十三章荧光激活细胞分选仪的简介及其应用196

二、数据资料的表达形式198

三、使用仪器的要点199

（一）蒸气消毒20

三、消毒20

四、仪器的用途200

主要参考文献203

第二十四章B淋巴细胞杂交瘤技术和单克隆抗体204

一、杂交瘤技术的原理204

二、人源单克隆抗体205

（一）抗原致敏的B淋巴细胞的来源206

（二）细胞融合207

主要参考文献209

第二十五章器官培养的方法210

一、一般原则211

（二）营养和气体的保证212

二、培养液212

（一）细胞迁移的抑制212

三、气相的组成214

（二）在液-液界面上的支持培养215

（一）悬浮培养215

四、不和气相接触的培养215

（一）没有支持物的漂浮法216

五、在气液界面上的培养216

（五）旋转管培养法216

（四）与赛璐玢接触的移植物216

（三）放置在琼脂凝胶中的培养216

（二）飘浮的“救生圈”217

（三）硬平板或格栅培养法217

（一）血浆凝块培养法218

六、在固体基质上的培养法218

（二）琼脂凝胶培养法219

七、循环融合系统219

（二）干燥高温消毒22

九、器官组建220

八、器官灌注系统220

十、其他一些专门的方法221

（一）卡氏瓶法和试管法221

（二）表玻璃培养法221

（三）滤纸虹吸法221

十一、关于技术的一些讨论222

（一）胚胎器官的培养222

（二）成年器官的培养222

（三）培养物的体积222

主要参考文献223

一、环境影响224

第二十六章器官培养物的分化与发育224

二、团块影响225

三、不同组织间的相互作用225

四、肿瘤细胞的相互作用和分化226

五、病毒、致癌剂和分化226

六、诱导物和肿瘤的再分化227

主要参考文献228

第二十七章器官培养物的癌变229

一、化学致癌229

（三）过滤消毒23

二、病毒致癌231

主要参考文献231

一、淋巴样分化232

第二十八章器官培养物的免疫学现象232

三、继发性免疫反应和持续产生抗体233

二、原发性免疫反应的诱导233

四、化疗药物对器官培养物的毒性234

主要参考文献236

第二十九章人体胚胎和肿瘤器官培养237

一、胚胎的器官培养法238

二、体外胚胎器官的异源性嵌合238

（一）鸡和小鼠器官的异源性嵌合238

（二）哺乳类动物肿瘤与鸡胚的异源性嵌合238

（二）隔以卵黄膜或透析膜的人瘤中肾上器官培养法239

（一）在中肾上的人瘤器官培养法239

三、人瘤的器官培养法239

（三）以酵母渗析物为基质的人瘤器官培养法240

（四）以鸡胚中肾和杨氏鸡肝的渗析物为基质的人瘤器官培养法240

四、体外人瘤器官的重建241

五、人瘤的短期器官培养241

主要参考文献242

第三十章器官培养在生物学研究上的应用243

一、形态发生的研究243

（一）肢芽的形态发生243

（二）胸骨的形态发生243

二、腺体发育分化的研究246

（一）乳腺发育及维持分泌功能的激素依赖246

（二）唾液腺的分化247

（四）胰腺的发育分化248

（五）脑垂体的发育分化248

（三）甲状腺的分化248

三、生殖腺的培养251

四、骨骼和软骨的器官培养252

五、神经组织的器官培养255

主要参考文献257

第三十一章器官培养在医学研究上的应用258

一、肿瘤细胞重聚体和浸润行为的研究258

二、诱导物与肿瘤分化的关系259

（一）胚胎诱导物方面259

（二）培养液的作用260

三、器官培养在癌变发生上的应用261

（一）乳腺261

（二）前列腺262

（三）肺和气管263

（四）唾液腺264

（五）卵巢264

（六）肠道264

（七）皮肤265

（八）肾和膀胱265

四、器官培养物在肿瘤治疗上的应用266

主要参考文献268

（四）其他消毒方法27

主要参考文献27

（一）培养液的组成成分28

第四章培养液的组成和制备28

一、培养液的基本成分28

二、平衡盐溶液30

（三）培养液水质30

（二）培养液的物理性质30

（一）血浆32

三、培养液中天然成分32

（二）血清34

（三）胚胎浸出液35

四、人工合成培养液36

（一）人工合成培养液的发展36

五、培养液的配制41

（一）HCO-3，CO2和HEPES浓度的关系41

（二）几种常用人工合成培养液的组成成分及其含量41

（二）基本配制法42

六、培养液的选择43

七、抗生素的选择和应用44

主要参考文献45

第五章无血清培养液46

一、无血清培养液的补充成分及其作用47

（一）可取代血清的补充成分47

（二）促进有丝分裂因子47

（三）贴壁和铺展因子50

二、建立成细胞系和细胞珠的无血清培养51

（一）基础培养液的选择58

（二）不同哺乳类细胞的低蛋白和无血清培养液的配方58

三、无血清培养的实际操作问题58

主要参考文献59

四、最适培养液选择步骤的设计59

第二章实验室及实验室装备6

一、实验室6

（一）装备室6

第六章污染及污染检测61

一、细胞微生物污染的类型61

二、微生物污染的检测61

三、细菌和真菌62

四、支原体63

（一）支原体的检测64

（二）污染支原体的处理65

五、病毒66

主要参考文献67

六、细胞间的交叉污染67

第七章组织培养方法的选择68

一、悬滴培养法68

（一）单盖玻片悬滴培养法69

（二）培养室7

（三）恒温暖房7

（二）双盖玻片悬滴培养法70

二、培养瓶培养方法70

三、旋转管培养法73

四、灌注小室培养法74

五、各种培养方法的交替使用和改良76

主要参考文献76

第八章原代细胞培养77

一、解离组织77

（一）剖取小鼠胚胎77

（二）剖取鸡胚78

（三）解取胚胎组织或器官原基78

（四）人体活检（或手术）材料78

（五）成体动物组织的剖取79

二、解离释放细胞79

（一）胰蛋白酶解离细胞法79

二、实验室设备8

（四）其他实验室8

（二）胶原酶解离细胞法81

（三）机械解离细胞法82

（四）螯合剂解离细胞法82

（一）外植块培养83

三、细胞原代培养83

（三）悬浮细胞培养84

（二）单层细胞培养84

（四）细胞培养中应注意的要点85

主要参考文献86

第九章细胞系与细胞克隆87

一、再培养87

（一）提示需要更换新的培养液的因素87

（二）再培养的确定87

（三）再培养的方法88

三、细胞克隆89

二、细胞系的建立89

（一）培养箱或恒温箱9

（二）消毒器9

（一）细胞克隆技术90

（二）影响群落形成效率的因素92

（三）克隆的分离95

主要参考文献97

第十章培养细胞的生物学98

一、培养物98

二、细胞系99