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第一章 多胺及其代谢酶类1

一、多胺的生物合成与代谢1

(一)多胺的生物合成1

(二)多胺的分解代谢3

二、酶在控制多胺合成中的作用3

三、多胺的生物作用5

(一)促进细胞生长发育5

(二)影响核酸、蛋白质的合成5

(三)人体组织和体液中的多胺水平6

四、多胺作为肿瘤诊断和治疗的标志7

(一)癌症病人体液的多胺水平7

(二)多胺测定作为判定疗效和预后的标志13

五、鸟氨酸脱羧酶与肿瘤15

(一)鸟氨酸脱羧酶活性的诱导作用16

(二)鸟氨酸脱羧酶促使肿瘤生成的作用机制18

(三)鸟氨酸脱羧酶作为肝癌标记物21

(四)鸟氨酸脱羧酶作为大肠肿瘤的标记物23

六、5’-甲基硫代腺苷磷酸酶代谢的重要性25

七、多胺生物合成抑制剂28

(一)鸟氨酸脱羧酶抑制剂28

(二)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抑制剂33

(三)丙胺转移酶抑制剂35

八、抗多胺合成抑制剂(抗酶抑制剂)36

(一)鸟氨酸氨基甲酰转移酶测定法37

九、多胺及其代谢酶的测定方法37

(二)鸟氨酸脱羧酶活性测定法39

(三)尿多胺层析-常压电泳测定法42

(四)尿多胺的测定——试纸法44

(五)尿多胺的高效液相色谱测定法46

(六)血中多胺的高效液相色谱分析48

(七)癌瘤组织多胺的测定法49

(八)人血清精胺的放射免疫测定法51

(九)血清精脒放射免疫测定法53

第二章 活性氧及抗氧化酶70

一、自由基的产生及其清除体系70

(一)自由基产生途径70

(二)机体的抗氧化防御体系74

二、自由基代谢失衡与肿瘤发生76

(一)肿瘤组织细胞中自由基存在的状况76

(二)脂质过氧化与肿瘤77

(三)化学致癌的自由基机制80

三、超氧化物歧化酶与肿瘤81

(一)超氧化物歧化酶81

(二)异常转化细胞及实验动物肿瘤组织细胞的超氧化物歧化酶状态83

(三)人体肿瘤组织细胞及肿瘤宿主血中的超氧化物歧化酶状态84

四、过氧化氢酶与肿瘤86

五、谷胱甘肽过氧化物酶及其他抗氧化酶与肿瘤89

六、部分抗氧化酶活性及过氧化脂质测定方法92

(一)超氧化物歧化酶活性测定法92

(二)全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定法93

(三)过氧化氢酶(CAT)活性测定法97

(四)丙二醛(MDA)含量测定法98

第三章 谷胱甘肽S-转移酶109

一、理化性质109

二、生理功能和分布110

三、谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤112

(一)谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤的发生及预防112

(二)人类肿瘤组织中的谷胱甘肽S-转移酶表达115

(三)谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤多药耐药性117

四、谷胱甘肽S-转移酶检测方法123

(一)人胎盘谷胱甘肽S-转移酶的纯化124

(二)抗血清的制备124

(五)双抗体夹心型酶联免疫吸附测定血清/血浆GST-π含量126

(三)抗体的纯化126

(四)抗GST-π- IgG与辣根地氧化物酶(HRP)交联制备酶标抗体126

(六)GST-π免疫组织化学染色法128

第四章 酪氨酸蛋白激酶和酪氨酸蛋白磷酸酶140

一、酪氨酸蛋白激酶140

(一)酪氨酸蛋白激酶基本特性141

(二)酪氨酸蛋白激酶与肿瘤142

二、酪氨酸蛋白磷酸酶149

(一)酪氨酸蛋白磷酸酶结构及生物学特性150

(二)酪氨酸蛋白磷酸酶与肿瘤152

三、检测方法153

(三)抗体的纯化和标记154

(一)原理154

(二)抗血清的制备154

(四)ELISA测定156

第五章 O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶168

一、O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的生物学特性168

(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的功能及理化特性168

(二)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的结构和基因170

(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶在正常组织中的分布172

二、O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶与肿瘤173

(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶在肿瘤细胞中的表达173

(二)Mer+ 与肿瘤化疗的关系174

(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶功能的去除176

(四)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶与肿瘤易感性178

三、检测方法179

(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶蛋白溶液的制备179

(二)O6-[3H]MeG DNA底物的制备180

(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶定量测定180

(四)蛋白质定量测定(Lowry法,又名Folin-酚测定法)181

第六章 烯醇化酶及其同工酶196

一、烯醇化酶的分布及化学结构196

二、神经元特异性烯醇化酶的生物学性质197

三、神经元特异性烯醇化酶与肿瘤198

(一)健康人血清和脑脊液的神经元特异性烯醇化酶水平200

(二)原发性肺癌201

(三)神经母细胞瘤205

(四)神经内分泌肿瘤206

(五)精原细胞瘤207

(六)胺前体摄取脱羧细胞瘤208

四、烯醇化酶及其同工酶测定方法208

(一)直接分光光度法209

(二)PK-LDH酶偶联速率法210

(三)PK-HK-G6PD酶偶联速率法212

(四)生物发光法213

(五)琼脂糖凝胶电泳法215

第七章 丙酮酸激酶221

一、丙酮酸激酶的分布221

二、理化特性221

三、丙酮酸激酶与肿瘤222

(一)丙酮酸激酶在化学诱癌过程中的变化223

(二)丙酮酸激酶活性在肿瘤中的改变223

(三)丙酮酸激酶同工酶谱改变的意义226

四、检测方法228

(一)丙酮酸激酶活性测定228

(二)丙酮酸激酶同工酶测定229

第八章 DNA聚合酶235

一、概述235

二、a-DNA聚合酶的分布及理化性质237

三、a-DNA聚合酶的活性与肿瘤239

四、血清DNA聚合酶活性测定的RIA法241

一、α-L-岩藻糖苷酶的分布、理化性质及功能246

第九章 α-L-岩藻糖苷酶246

二、α-L-岩藻糖苷酶与原发性肝癌的相关性研究247

三、原发性肝癌宿主血清α-L-岩藻糖苷酶升高的可能机制249

四、血清α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法251

第十章 γ-谷氨酰转肽酶254

一、γ-谷氨酰转肽酶的生理功能255

二、γ-谷氨酰转肽酶的临床应用257

三、γ-谷氨酰转肽酶与肿瘤259

四、γ-谷氨酰转肽酶与肝癌的关系260

(一)肝癌癌组织的γ-谷氨酰转肽酶实验研究260

(二)血清γ-谷氨酰转肽酶的临床应用261

(三)γ-谷氨酰转肽酶的变异体264

(四)γ-谷氨酰转肽酶Ⅱ对肝癌的诊断价值266

五、血清γ-谷氨酰转肽酶的测定方法268

(一)国际临床化学学会推荐的测定法268

(二)对氨基苯磺酸法270

(三)γ-GT同工酶的聚丙烯酰胺阶段梯度凝胶电泳测定法272

第十一章 醛缩酶279

一、醛缩酶及其同工酶的分布280

二、醛缩酶的化学组成和性质283

三、醛缩酶的作用机理和生理功能285

四、血清醛缩酶及其同工酶测定的临床意义286

五、醛缩酶与肝癌关系的研究291

六、醛缩酶及其同工酶的检测方法293

(一)醛缩酶总活性测定293

(二)醛缩酶同工酶的测定297

第十二章 乳酸脱氢酶302

一、乳酸脱氢酶同工酶的化学组成302

二、乳酸脱氢酶同工酶在机体组织中的分布304

三、乳酸脱氢酶同工酶的生理意义307

四、乳酸脱氢酶同工酶与肿瘤310

(一)正常细胞癌变时乳酸脱氢酶同工酶谱的返祖现象310

(二)乳酸脱氢酶同工酶变化与糖代谢异常311

五、乳酸脱氢酶同工酶的临床应用312

(一)胃癌313

(二)食管癌及贲门癌318

(三)卵巢癌321

(四)宫颈癌322

(五)白血病323

(六)肝癌326

(七)脑瘤328

(八)睾丸癌330

(九)前列腺癌330

(十)肺癌331

(十一)其他恶性肿瘤331

六、乳酸脱氢酶同工酶的测定方法333

(一)聚丙烯酰胺凝胶电泳测定乳酸脱氢酶同工酶335

(二)小柱层析法分离测定乳酸脱氢酶同工酶337

(三)血清乳酸脱氢酶总活性测定340

七、影响乳酸脱氢酶同工酶谱的因素342

一、蛋白激酶C的组成与分布351

第十三章 肿瘤化学防治的新靶点——蛋白激酶C351

二、蛋白激酶C的结构特征352

三、蛋白激酶C的活化机制354

四、蛋白激酶C的抑制作用356

五、蛋白激酶C的生理意义357

六、蛋白激酶C与肿瘤发生360

七、蛋白激酶C与抗肿瘤药物研究363

(一)蛋白激酶C抑制剂的抗肿瘤作用364

(二)蛋白激酶C与多药耐药性365

八、蛋白激酶C的提取和活性测定方法366

(一)蛋白激酶C的提取及部分纯化367

(二)蛋白激酶C活性测定——同位素标记法367

(三)蛋白激酶C活性测定——非同位素酶解测定法369

第十四章 DNA拓扑异构酶与抗肿瘤药物研究373

一、DNA拓扑异构酶的生化特性373

(一)DNA拓扑异构酶Ⅰ373

(二)DNA拓扑异构酶Ⅱ375

二、DNA拓扑异构酶的生理意义378

三、DNA拓扑异构酶与抗肿瘤药物379

(一)DNA拓扑异构酶抑制剂379

(二)DNA拓扑异构酶与抗药性的关系383

(三)DNA拓扑异构酶与抗癌新药的研制展望385

四、DNA拓扑异构酶及其抑制剂的有关实验研究方法385

(一)DNA拓扑异构酶提取纯化方法385

(二)DNA拓扑异构酶活性检测及其药物效应测试方法386

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