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简介lac基因体系1

本书内容安排的方式与材料的应用4

专用名词5

菌株种类一览表10

第一章初步实验16

第一章 简介17

实验21

1.活菌数的测定：细菌生长曲线21

2.噬菌体的制备与溶菌斑的测定28

3.突变菌株生长于指示培养基上的反应42

4.复印接种法52

第二章雌菌与雄菌的交配57

第二章 简介59

实验87

5.表体的传递——直接筛选法87

6.间歇交配程序以及基因传递的时间92

7.利用传递梯度现象测定标志基因在大肠菌染色体上的位置100

8.Hfr菌株传递始点的测定104

9.利用菌体对噬菌体敏感的特性测定其携带性别因子的情形106

10.F-拟表型的制备110

11.使用吖啶橙去除大肠菌体内的表体113

12.重组能力有缺陷的菌株对于表体的传递与重组作用的影响116

第三章致变作用及突变种的分离119

第三章 简介120

实验133

13.紫外线的致变作用133

14.亚硝基胍的致变作用137

15.架构移改致变物的致变作用：ICR191143

16. 2—氨基嘌呤与亚硝酸的致变作用148

其他的致变物及其致变作用：乙 基甲烷磺酸塩，羟胺，5—溴尿嘧啶，亚硫酸氢钠，Mμ—1噬菌体152

17. 回复突变的测定155

18.分离lac操纵基因群的温度敏感突变菌株160

19.分离La c-与i-的自发突变型菌株161

20. L a c突变菌株的互补试验——同一基因内的互补作用171

21.图谱Lac-突变种的细部遗传结构180

22.—24.简介蛋白质多肽链的终止，极性现象与阻遏现象185

22.无意义突变菌株的分离191

23.阻遏菌株的分离199

24.测定lac操纵基因群的极性突变种209

第四章菌株的改造217

第四章 简介218

表体的传递219

实验219

25.F ’因子的传递——适用于无法筛选的雌菌的条件219

26.F’因子的传递——适用于无法去除雄菌的情况223

27.含有温度敏感表体的菌株的制造227

28.一般性转运：利用P1噬菌体作为菌株改造的工具233

29. F’因子为媒介的染色体传递239

30.—32.简介基因的操纵244

30.利用P2噬菌体分离大肠菌的His-菌株250

31.利用Trimethoprim筛选Thy-菌株254

32.抵抗缬氨酸与抗生素的菌株的分离257

A抵抗缬氨酸的菌株257

B 抵抗宁格兰素的菌株259

C抵抗利法必素的菌株261

D抵抗氨苄基青霉素的菌株262

其他用于筛选的标志基因263

营养缺陷突变种的筛选274

33.利用青霉素与氨苄基青霉素分离营养缺陷突变种274

其他增进菌体纯一的方法279

34.温度敏感致死突变种的分离与图谱281

35.—36.简介制造Hfr 菌株297

35.筛选染色体上含F因子的菌株301

36.改变F-菌株为Hfr菌株305

A 改变一支F-菌株为Hfr H305

B 改变一支F-菌株为Hfr C （Cavalli）菌株309

37. F’因子的形成：利用Rec-菌株分离携带大肠菌不同基因的F’因子312

38. 利用同基因关系改造菌株319

第五章噬菌体的转运作用以及专属性转运噬菌体的分离325

第五章 简介326

实验39.专属性转运噬菌体的制造329

实验40.—41.简介迁移细菌的基因到噬菌体原接触点的邻近位置339

实验40.lac基因段落的移位341

40.A筛选DNA上含有F’lac的菌株344

40.B发生于ton B基因的移位作用348

41.A迁移λ DNA至细菌染色体上的新位置351

41.B缀合两个基因的融合表体的筛选方法361

42.A筛选lac与trp操纵基因群融合的菌株365

42.B制备trp-lac 融合菌株的trp R-衍生菌株376

第六章λ h80d lac DNA的转化作用与lac RNA的测定381

实验382

43. λ h80d lac 噬菌体的制备与λ h80d lac DNA的转化作用382

44.—47.简介391

44.自I PTG诱致的菌体分离活体内标志的辐射性核糖核酸393

45. λ plac DNA的分股396

46. lac mRNA与λ plac5 DNA的杂合405

47.测定lac mRNA的沉降常数412

第七章lac操纵基因群诸酶的测定417

第七章 简介418

实验419

48.β—半乳糖苷酶的测定419

49.诱致β—半乳糖苷酶的时间过程424

50.lac透膜酶的测定428

51.利用压抑体与诱致物结合的方法测定lac压抑体431

52.利用压抑体与操作基因结合的方法测定lac压抑体435

53.乙醯移转酶的测定440

54. α互补作用的测定443

第八章蛋白质的纯化446

第八章 简介447

实验456

55.lac压抑体的纯化456

56. 测定lac压抑体与I PTG的结合常数467

57.β—半乳糖苷酶的纯化471

第九章环状AMP，异化代谢压抑作用以及无细胞体系的酶合成480

第九章 简介481

实验488

58.环状AMP与异化代谢的压抑作用488

59.对异化代谢物敏感的操纵基因群其无表现因子之突变种的筛选方法491

60.利用无细胞系统合成β—半乳糖苷酶496

61.无细胞系统的异化代谢压抑作用504

62.无细胞系统合成β—半乳糖苷酶时的压抑作用506

附录509

附录Ⅰ公式与培养基配方509

Ⅱ菌体交配中断器的应用516

Ⅲ大肠菌的遗传结构图519

Ⅳ基因图谱的一般策略：图谱吡多醇二生化合成基因的策略531

Ⅴλ噬菌体的遗传因子535

Ⅵ利用滤片法测定lac压抑体538

Ⅶ可自大肠菌K12菌株体内筛选而得的F’因子540

Ⅷ 实验物品供应公司与地址541