《表1 离子色谱多级梯度淋洗条件》

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《积分脉冲安培检测-离子色谱法同时测定果汁中20种氨基酸》

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一般淋洗梯度条件难以实现20种氨基酸组分的有效分离，为提高检测灵敏度和色谱峰分离度，先后根据不同淋洗时间段、不同淋洗浓度、不同淋洗斜率进行了30多次实验研究分析，最终根据分离效果和基线稳定性选取了表1中多级梯度淋洗条件。从表1中可以看出，色谱分离淋洗时间被分成5段（0～12min、12～16min、16～24min、24～40min、40～50min），初始淋洗浓度是整个多级梯度淋洗条件的基础，因此在0～12min采用的是50mmol/L氢氧化钠淋洗液，恰好能够实现前10种弱保留组分有效分离。在12～16min时间段，选择斜率为7.00mmol/（L·min）浓度氢氧化钠淋洗液梯度，可确保组分11至组分13有效分离；在16～24min时间段，开始使用较强淋洗溶液醋酸钠溶液，为中强保留组分洗脱和分离做好准备。在24～40min时间段，选取氢氧化钠溶液、醋酸钠溶液、去离子水配比（24∶40∶36）的梯度淋洗溶液进行洗脱，确保了组分14～19的有效分离。在40～50min时间段中，为使强保留组分色氨酸快速洗脱，选择了氢氧化钠溶液、醋酸钠溶液配比（50∶50）浓度的洗脱液，图1是20种氨基酸混合标准溶液离子色谱图。