《表1 水稻褐飞虱与白背飞虱抗性基因连锁标记及引物序列》

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《聚合白背飞虱和褐飞虱抗性基因创制杂交水稻恢复系》

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用于PCR的引物RM8213[21]、RI35和Y15[24]由福州擎科生物技术有限公司合成（表1）。PCR在ABI 9700 PCR系统上进行。10μL PCR体系中含有2×PCR混合液5μL，10μmol/L正反向引物各0.5μL，DNA模板1μL，ddH2O 3μL。反应程序如下：95℃下预变性5 min；94℃下变性30 s，55℃下退火30 s，72℃下延伸40 s，35个循环；最后在72℃下延伸5 min。其中退火温度依据不同引物进行调整。扩增产物在6%聚丙烯酰胺凝胶（qsI-4基因）上恒压电泳（120 V，90 min），或1.5%琼脂糖凝胶（Bph14和Bph15基因）上恒压电泳（120 V，30 min），用荧光染料Genefider染色15 min，最后在BIO-RAD凝胶成像系统上拍照记录。