《表2 ATP浓度及发光波长的优化》

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《LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究》


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Kinase-Glo试剂最大能测得的ATP浓度为10μM,因此初步设定ATP浓度为5μM和10μM,与Kinase-Glo试剂反应并测定发光。然而,在这两种ATP浓度下,发光值过大,不能准确测出(数据未显示)。因此梯度稀释ATP,与Kinase-Glo试剂反应并测定发光。表2为稳定的发光值记录(ATP与Kinase-Glo试剂反应40min),可见最大发光波长在550-570nm之间,随着ATP浓度的增加,发光值逐渐增加,ATP浓度为5μM时,发光值过大,无法测定。因此,选择0-3μM浓度的ATP绘制标准曲线。综合考虑,选择发光波长为560nm。