《表1 土壤中FOC4基因组提取率分析》

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《土壤中香蕉枯萎病菌FOC4的实时荧光定量PCR检测》

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注:*:由于此样品核酸拷贝数低，做荧光定量PCR时采用模板体积为10μL

配制FOC4孢子含量梯度的标准土样，采用MoBio公司Power Soil DNA Isolation Kit试剂盒提取土样总DNA为模板，进行荧光定量检测标准土样的FOC4孢子含量，通过标准曲线计算各样本核酸拷贝数。样本定量拷贝数与理论拷贝数（假设FOC4孢子DNA提取率为100%）的比值为土壤中FOC4基因组的提取率。经对比发现，土壤中FOC4孢子的基因组提取率较低，土壤中FOC4孢子的含量越高，基因组提取率越高。当含量在1.66×104、1.66×105和1.66×1063个数量级时，FOC4的提取率在12.8%～13.5%，相对稳定。当FOC4孢子含量在1.66×103时，提取率不稳定（表1）。因香蕉枯萎病发病土壤的孢子含量在103～106之间，发病下限的孢子浓度为103 cfu/g土。提取土壤总DNA时，土壤中FOC4的提取率可采用13%对荧光定量检测值进行校正，还原土壤中FOC4的真实含量。