《表1 抗体信息:猪胚胎体外培养体系优化对胚胎干细胞建系的影响》
细胞克隆长至尺寸适中,DPBS清洗3次,加入200~300μL透膜液(PBS+1%Triton)37℃透膜1 h,清洗液(PBS+1/1000 Tween+1/10 000 TritonX-100)清洗2~3遍后加入封闭液(PBS+1/1 000 Tween+1/10 000 TritonX-100+1%BSA)37℃封闭1 h,用封闭液按照要求比例稀释一抗(见表1),4℃过夜孵育,第2天用清洗液在摇床中清洗一抗3次,每次洗涤5 min。根据适宜比例以清洗液稀释二抗,37℃条件下作用1 h清洗液在摇床上洗涤细胞3次,每次洗涤5 min。洗涤完毕后,避光条件下细胞核染色10 min,摇床上用清洗液洗涤3次,每次洗涤5 min,载玻片点上少许抗荧光猝灭剂后封片,荧光显微镜下观察拍照。
图表编号 | XD0085416600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.09.25 |
作者 | 余卓然、张雪、高放、安铁洙、孔庆然、刘忠华 |
绘制单位 | 东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物与细胞遗传工程重点实验室、东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物与细胞遗传工程重点实验室、东北林业大学生命科学学院、东北林业大学生命科学学院、东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物与细胞遗传工程重点实验室、东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物与细胞遗传工程重点实验室 |
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