《表1 消毒方式:鸢尾蒜种子无菌萌发及鳞茎形成》

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《鸢尾蒜种子无菌萌发及鳞茎形成》


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试验参考任梓铭等[7]石蒜属种子无菌播种的方法进行,并做少量改动。将不同贮藏方式下的鸢尾蒜种子置于清水或800 mg/L的GA3溶液中浸泡12 h,然后将种子置于含少许洗洁精和吐温20(Tween-20)的水中浸泡15 min,用流水冲洗1.5 h。在超净工作台上将种子夹入50 mL灭菌离心管内,完成对种子的消毒。消毒时间梯度设置参考李岳等对野生郁金香种子的消毒方法[15],具体见表1(S1~S6表示6种不同的消毒方式)。以75%乙醇涡旋30s、结合0.1%HgCl23 min处理为例:向离心管中加入75%乙醇,于涡旋振荡器(型号:WH-861)涡旋消毒30 s,倒出乙醇后,用无菌水漂洗3遍,再加入0.1%HgCl2溶液至浸没种子,手按住离心管于涡旋振荡器上涡旋3 min,最后用无菌水漂洗4遍,每遍不少于1 min。消毒完成后将种子接种于含30 g/L蔗糖的不同6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine,6-BA)及萘乙酸(1-naphthylacetic acid,NAA)配比的培养基中,基本培养基采用MS培养基,置于25℃或4℃冷柜中黑暗培养。培养基、培养温度、种子预处理、贮藏条件等共构成11种不同的处理,具体见表2(T1~T11表示11种不同的处理条件)。