《表5 ZMO1885过表达效果检测》
通过生物量和ROS实验,证明了所挑选3个基因中仅ZMO1885过表达能够显著去除胞内ROS,并显著提高菌株在糠醛抑制下的生物量。为考察该基因过表达对细胞的其他影响,表5展示重组菌株与对照菌株的ZMO1885基因表达量、NADH氧化酶酶活及NADH/NAD+比值。尽管构建菌株中使用了强启动子Pgap,重组菌中的ZMO1885表达量仅仅比对照菌株上调了2.26倍,该基因的表达量可能受到细胞严格控制。NADH氧化酶酶活实验与转录数据相符合,实验测得的所有以NADH为辅因子的全细胞NADH氧化酶酶活仅微弱上升8.28%。一方面重组菌中的酶量和酶活改变小,另一方面,细胞内除ZMO1885编码的NADH氧化酶外,还存在其他能利用NADH作为辅因子的氧化还原酶,因此导致胞内的NADH/NAD+比例并没有显著的差异。综上所述,过表达ZMO1885并未引起运动发酵单胞菌氧化还原水平失衡的现象,不会影响其他利用NADH作为辅因子的氧化还原酶的功能。因此在无抑制物添加情况下并没有造成对菌体生长的影响。而当有糠醛加入后,又能发挥自身的功能去除ROS,避免细胞死亡。
图表编号 | XD0075586300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.26 |
作者 | 闻远、夏娟、戚良华、刘小伟、刘晨光、白凤武 |
绘制单位 | 微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院、微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院、上海保兴生物设备工程有限公司、上海保兴生物设备工程有限公司、微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院、微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院 |
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