《表2 红色毛癣菌菌体总RNA的OD260/OD280、OD260/OD230值和质量浓度》

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《红色毛癣菌pho88基因的克隆及生物信息学分析》

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提取红色毛癣菌菌体总RNA，进行琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统拍照，结果如图1，28S、18S和5S条带较清晰，但在点样孔处有亮带，提示有一定的蛋白质或者多糖污染，并且28S与18S条带亮度比<2:1，表明28S有一定程度的降解。使用NanoDropTMOne/Onec微量紫外可见光分光光度计检测总RNA的OD260/OD280和OD260/OD230值（见表2），纯RNA的OD260/OD280值为2.0，若小于2.0表明RNA中蛋白质等污染较多，若大于2.0，表明有一定的降解；纯RNA的OD260/OD230值为2.5，若比值小于2.0，表明被碳水化合物（糖类）等污染。检测结果表明，本实验中所提取的红色毛癣菌总RNA质量虽一般，有一定的降解和糖类污染，但总体来看可用于cDNA合成实验。按照PrimeScriptTM1stStrand c DNA Synthesis Kit说明书反转录为cDNA第一链，稀释10倍作为PCR扩增模板，剩余-20℃保存备用。