《表1 DAI评分标准:白头翁复方灌肠对溃疡性结肠炎模型大鼠MUC2、IL-6及IL-10的影响》
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《白头翁复方灌肠对溃疡性结肠炎模型大鼠MUC2、IL-6及IL-10的影响》
注:正常大便:成形的大便;松散大便:不粘肛周的糊状大便;腹泻:粘肛周的稀水样便
1) 一般状态:每天观察大鼠的一般状态(毛色、饮食、精神、活动情况、大便情况),称体质量并记录。进行疾病活动指数(DAI)评分[7](表1),DAI=体质量下降评分+大便性状评分+便血评分。2) 结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分:CMDI评分参照Luketal标准[8]进行(表2)。3) 结肠组织病理学评分:甲醛固定后的组织,流水冲洗过夜,行常规组织脱水、固定、透明、石蜡包埋、切片、HE染色,光镜下观察结肠黏膜病理变化,并采用Dieleman[9]标准行结肠组织病理学评分(表3)。4) 结肠组织细胞凋亡情况:采用TUNEL检测大鼠结肠组织细胞凋亡变化,操作流程按照试剂盒说明书进行。根据凋亡细胞分布情况在400倍光镜下,每组切片拍摄5个阳性视野,每个视野计数500个细胞,以计算平均凋亡细胞数所占百分比作为凋亡指数。5) 炎症细胞因子检测:采用ELISA法测定大鼠血清IL-6、IL-10水平,操作流程按照试剂盒说明书完成。采用RT-PCR法检测各组大鼠结肠组织IL-6、IL-10基因表达量,以β-actin为内参,IL-6、IL-10引物由四川生工科技有限公司设计并合成(表4)。6) 免疫组化检测结肠黏膜组织MUC2的表达:按免疫组化试剂盒说明书操作。MUC2表达于大鼠结肠黏膜表面的上皮细胞、隐窝上皮细胞等,MUC2阳性表达细胞以细胞质着色为主,呈棕黄色、粗颗粒状分布,细胞核不着色。
图表编号 | XD007029000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.04.05 |
作者 | 张瑞芳、陈朝晖、李灿、刘海荣、刘漪沦、刘卫华 |
绘制单位 | 成都医学院、成都医学院第一附属医院中西医结合科、成都医学院第一附属医院中西医结合科、成都医学院第一附属医院科研实验中心、成都医学院第一附属医院科研实验中心、成都医学院第一附属医院科研实验中心、成都医学院第一附属医院科研实验中心 |
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