《表3 TRFIA法检测STEC菌株StxI特异性分析》

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《I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立》


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注:a以阴性LB培养基标本的荧光计数值平均值加2个标准差作为阳性阈值判断样本中StxI结果。

用TRFIA和ELISA分别检测不同稀释倍数的StxI阳性菌液882364毒素粗提物(11~11 024)。结果显示,用TRFIA检测时,随着样本上清稀释倍数的增加,荧光值由578 232逐渐降低至29254,但是仍然>LOD,结果判定为阳性。与本实验室建立的ELISA相比较(ELISA对于StxI的检测灵敏度为110) ,TRFIA检测StxI的灵敏度提高了大约2个数量级。将高浓度纯化StxII毒素梯度稀释为浓度为0.1~1 000ng/mL的溶液,以LB培养基为阴性对照,StxI阳性菌株99A029的毒素粗提物为阳性对照,用本方法测定,结果StxII毒素梯度稀释样本结果均为阴性(见表3),说明本体系与StxII检测无交叉反应,显示出良好的特异性。