《表2 不同浓度和时间的菌液侵染对不同外植体转化的影响》

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《马铃薯遗传转化体系的优化建立及其主要影响因素》


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首先,用不同浓度的农杆菌菌液浸染马铃薯外植体5~15 min,共培养3 d后,观察外植体生长状况;结果表明(表2),农杆菌浓度菌液OD600≥0.7时,农杆菌生长旺盛,外植体切口变黑,污染严重,死亡率随菌液浓度增高而增高。而菌液浓度OD600<0.3时,可提高成活率,但浓度太低会影响转化效率。侵染时间不宜太长,若侵染时间过长,外植体在菌液中放置过久,则因浸泡缺氧而软腐,导致外植体丧失愈伤组织形成和芽分化再生的能力,侵染时间过短又会影响后期目的基因的转入率。因此,综合考虑分化率和后期的转化率,确定合适的菌液浓度的OD600值为0.3~0.5,侵染时间为10 min。