《表1 不同浓度、时间的菌液侵染对不同外植体转化的影响》

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《马铃薯双抗病毒转基因技术初步研究》


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通过对农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间等方面对马铃薯遗传转化率的影响进行了研究,筛选出了适宜的转化条件。首先用不同OD值的农杆菌液浸染外植体5~15 min,共培养后观察外植体状况;结果显示:农杆菌浓度菌液OD600值高于0.7时,农杆菌生长旺盛,导致外植体污染严重,逐渐变黑,死亡率升高。而菌液浓度OD600值低于0.3时可提高成活率,但浓度太低会影响转化效率。侵染时间过短又会影响后期目的基因的转入率(表1),因此,侵染时间一般在15 min内较为适宜。综合考虑分化率和后期的转化率,确定合适的菌液浓度的OD600值为0.3~0.5,侵染时间为10 min。