《表1 序列分析引用的ITS序列》

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《高山杜鹃枯梢病病原菌鉴定及品种抗病性调查》

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从PDA平板上挑取适量菌丝，采用CTAB法提取菌丝基因组DNA。以通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增（ITS1:5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′，ITS4:5′-TCCTCCGCTTATTGATAT GC-3′）。PCR反应体系:10×PCR buffer 2.5μL，2.5 mmol·L-1 dNTP 2.5μL，20 pmol·L-1的ITS1和ITS4引物各0.5μL，5 U Taq酶0.3μL，模板DNA 1μL，加ddH2O补足至25μL。扩增反应程序为:94℃预变性4 min；94℃变性30 s、55℃退火50 s、72℃延伸1 min，35个循环；最后72℃延伸10 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测后，送至大连宝生物工程有限公司测序。将所得序列提交至NCBI数据库，进行BLAST序列比对。从GenBank下载相似度高的序列（表1），采用软件MEGA 5.0构建系统发育树。