《表1 引物序列:PTGER4基因多态性与广西壮族、汉族人群炎症性肠病的关系》

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《PTGER4基因多态性与广西壮族、汉族人群炎症性肠病的关系》


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(1) DNA提取:采用DNA试剂盒提取肠黏膜DNA。(2)位点的选择:从NCBI获取SNP信息,选择的SNP最小等位基因频率(MAF)>15%,结合文献报道,所选SNP可能与CD的并发症有关。(3)PCR扩增:(1)引物设计:根据NCBI基因数据库设计rs4495224和rs7720838位点引物,序列见表1。(2)PCR反应体系:DNA2μL+上下游引物各1μL+Master Mix 25μL+RNase-free Water21μL。(3)反应条件:变性94℃、30 s,退火50℃、30 s,延伸72℃、30 s,共30个循环,72℃继续延伸7 min。(4)基因测序:电泳鉴定目的片段,并将PCR产物送测序,用Chromas软件判读基因型。