《表2 聚焦/洗脱程序Table 2 Focusing/elution program》

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《基于非对称流场流分离系统优化脂蛋白的分离条件》

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实验中应用的聚焦方式为本课题组自行设计优化的聚焦/洗脱程序[20]，并使用标准蛋白考察其可行性。例如正交设计试验中5号组实验，其聚焦/洗脱程序见表2，控制载液泵入系统的总流速为3.50m L/min，总流速由A、B泵提供，其中A泵为进样泵，B泵为横向流速控制泵，通过改变总流速、A泵和B泵的流速比例，使程序在聚焦时间内保持沿通道方向流速为0.20 m L/min，C泵接口位于通道下方，将载液抽出通道并产生垂直于通道的横向流场，分离全程保持恒定流出速度3.00 m L/min（使载液进入检测器流速保持为0.50 m L/min），如表2中初始0~3.0 min即为聚焦时间（focusing time），3.0~4.0 min对应过渡时间（transition time），即系统由聚焦程序转换成洗脱程序的过渡时间，4.00 min之后为洗脱过程（elution period）。在每次进样前，均用超纯水以总流速4.00 m L/min（A、B泵各为50%），横向流出速度3.00 m L/min（C泵）冲洗分离通道15.0 min，然后用载液以当前分离流速条件平衡系统12.0 min，随后进样并启动聚焦/洗脱程序。紫外检测器检测波长设置为280 nm。