《表1 细胞毒性反应分级标准》

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《3D打印含铜钴基合金与PDLF细胞生物相容性初探》

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样品在接种细胞之前经由高温高压蒸气灭菌，完成灭菌后转移至超净台（SW-CJ-IFD，苏州安泰空气技术有限公司，中国）中，先用无菌PBS（Hyclone公司，美国）漂洗两次，漂洗后将1 mL人牙周膜细胞（PDLF）悬液以1×104细胞/孔的密度接种到放置有样品的48孔板内。接种完毕后，在CO2恒温培养箱中分别培育1、3、7 d，到达每个时间点后取出培养板，将样品用无菌PBS冲洗三次，再使用CCK-8试剂盒（Beyotime公司，中国）评价其毒性。加入250μL含有10%（v/v）CCK-8的D-MEM，然后将培养板放入CO2恒温培养箱中孵育4 h。到达时间点后，从每孔中吸取100μL培养基，并转移到新的96孔板中，使用酶标仪（Infinite 200 PRO，中国）测定其吸光光度值（OD值）。相对增长率（relative growth rate，RGR）通过方程式（1）计算，并按照表1中的要求，将RGR值转化成五级水平，评定材料的细胞毒性。RGR=（OD材料组-OD空白组）/（OD阴性对照组-OD空白组）×100% （1）