《表2 免疫印迹实验所用抗体》

《表2 免疫印迹实验所用抗体》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《人类巨细胞病毒感染树鼩原代真皮成纤维细胞诱导凋亡特性》


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使用RIPA裂解处理1.3中所述的感染组及Mock组细胞样本。通过BCA法建立标准曲线,换算得到各待测蛋白样本的浓度值。确定上样量后进行SDS-PAGE凝胶电泳,70 V恒压浓缩30 min,110 V恒压分离1 h。采用湿转法将电泳结束的PAGE胶按160 mA恒流转90 min至0.4μm的PVDF膜上,其中用于标记Caspase-3和Bax的PAGE胶,按160 mA恒流转50 min至0.2μm的PVDF膜上。结束后将膜置于含5%BSA的封闭液中室温摇动封闭1 h。根据表2对一抗进行稀释,然后4℃过夜孵育处理。次日使用TBST洗膜,二抗(表2)按1∶5 000稀释后于摇床上室温孵育1 h。TBST再次漂洗后,使用BIO-RED凝胶成像系统检测结果。