《表1 本研究使用的引物：黄淮海夏玉米主产区茎腐病主要病原菌及优势种分析》

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《黄淮海夏玉米主产区茎腐病主要病原菌及优势种分析》

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分离物鉴定法:参照《真菌鉴定手册》[26]和《中国真菌志-青霉属及其相关有性型属》[27]，依据菌落形态和分生孢子的大小及形态特征等对纯化的分离物进行形态学鉴定；并以真菌基因组DNA快速提取试剂盒（北京艾德莱生物科技有限公司）提取的分离物DNA作为模板，采用真菌、镰孢菌和卵菌的通用引物以及镰孢菌的种特异性引物进行PCR扩增，对分离物进行分子生物学鉴定。组织分子检测法[23]:使用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒（北京艾德莱生物科技有限公司）提取玉米髓部组织的基因组DNA，并使用上述引物进行PCR扩增。所用引物如表1所示，由北京诺赛基因组研究中心有限公司合成。PCR扩增体系及反应程序参考孙华等[28]的方法。25μL PCR反应体系:DNA 2.0μL，10μmol·L-1上游引物和下游引物各0.5μL，2×Es Taq MasterMix 12.5μL，补ddH2O至25μL。PCR反应程序:95℃预变性5 min；95℃变性1 min，退火30 s（各引物退火温度如表1所示），72℃延伸45 s，进行35个循环；72℃延伸10 min，4℃保存PCR产物。PCR产物经1%的琼脂糖凝胶电泳，阳性产物由北京诺赛基因组研究中心进行测序，测序结果在NCBI网站上进行BLAST比对。